目的 观察上皮型钙黏蛋白(E-cad)对小鼠胚胎干细胞(ESC)在体外向肝细胞分化的增强调控作用.方法 将E-cad转染入BALB/c小鼠ESC使其稳定表达,再利用肝细胞生长因子(HGF)等诱导其向肝细胞分化.然后用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝细胞标记基因ALB、TAT、Cyp7a1的表达,用RIA法检测培养液ALB和尿素合成情况,显微镜观察分化细胞数量和黏附状态.结果 (1)普通ESC在拟胚体(EB)形成后表达E-cad最强,其后表达降低至17 d不再表达,而E-cad-ESC则稳定表达E-cad; (2)肝细胞标记基因ALB、TAT和Cyp7a1在E-cad-ESC组表达要早于或强于普通ESC组,ALB和尿素合成方面,E-cad-ESC组早于普通ESC组[普通ESC组,ALB最早出现于第11天,浓度为(0.20 ±0.03) mg/L,在17 d达到最高为(3.71±0.45)mg/L;尿素最早出现于第12天,浓度为(8.01±1.21) μmol/L,在17 d达到最高为(45.01±8.01)μmol/L.E-cad-ESC组,ALB最早出现于第9天,浓度为(0.19±0.03)mg/L,在17d达到最高为(5.52±0.82) mg/L ;尿素最早出现于第10天,浓度为(5.90±1.21) μmol/L,在17 d达到最高为(56.93±9.03)μmol/L],差异有统计学意义 ;(3)普通ESC在分化后期表现为松散的细胞群落,分化细胞数量稀少,E-cad-ESC分化细胞数量明显增多,细胞黏附能力增强并呈紧密的多层生长.结
作者:胡安斌;商昌珍;闵军;蔡继业;何晓顺
来源:中华医学杂志 2012 年 92卷 44期