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目的 探讨脐带间充质干细胞(UC-MSC)上调系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血调节性T细胞(Treg)的作用机制.方法 20例SLE患者及正常人外周血单个核细胞(PBMC)分别与UC-MSC以不同比例共培养72 h,流式细胞术检测PBMC中CI4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞比例.分别以SLE患者及正常人PBMC及血清刺激UC-MSC,实时荧光定量聚合酶链反应检测UC-MSC TGF-β1mRNA表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测共培养上清TGF-β1表达水平.并构建TGF-β1小干扰RNA(siRNA)干扰UC-MSC TGF-β1表达及在共培养体系中加入TGF-β1抑制剂,探讨UC-MSC对SLE患者Treg细胞的调节作用.结果 UC-MSC呈剂量依赖性上调SLE患者外周血Treg细胞,且不依赖细胞直接接触,而对正常人外周血Treg细胞无调节作用.与无刺激组及健康志愿者PBMC刺激组相比,SLE患者PBMC显著促进UC-MSC TGF-β1 mRNA表达(1.00±0.09,1.95±0.62,4.20±2.34,P<0.05),细胞培养上清TGF-β1水平显著升高.SLE患者血清(5%)促进UC-MSC表达TGF-β1 mRNA(12.19±4.49),显著高于胎牛血清及正常人血清培养组(1.33±0.06,2.53±0.72),P<0.01.TGF-β1 siRNA干扰的UC-MSC对SLE患者外周血Treg细胞无上调作用(SLE PBMC+ TGF-β1 siRNA UC-MSC组2.33%±0.99%,SLE PBMC组1.80%±0.65%,P>0.05).此外,T

作者:鲁琳;王丹丹;李霞;曾小峰;孙凌云

来源:中华医学杂志 2013 年 93卷 13期

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作者:
鲁琳;王丹丹;李霞;曾小峰;孙凌云
来源:
中华医学杂志 2013 年 93卷 13期
标签:
红斑狼疮,系统性 间充质干细胞 调节性T细胞 转化生长因子β1 Lupus erythematosus,systemic Mesenchymal stem cells Regulatory T cells Transforming growth factor β1
目的 探讨脐带间充质干细胞(UC-MSC)上调系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血调节性T细胞(Treg)的作用机制.方法 20例SLE患者及正常人外周血单个核细胞(PBMC)分别与UC-MSC以不同比例共培养72 h,流式细胞术检测PBMC中CI4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞比例.分别以SLE患者及正常人PBMC及血清刺激UC-MSC,实时荧光定量聚合酶链反应检测UC-MSC TGF-β1mRNA表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测共培养上清TGF-β1表达水平.并构建TGF-β1小干扰RNA(siRNA)干扰UC-MSC TGF-β1表达及在共培养体系中加入TGF-β1抑制剂,探讨UC-MSC对SLE患者Treg细胞的调节作用.结果 UC-MSC呈剂量依赖性上调SLE患者外周血Treg细胞,且不依赖细胞直接接触,而对正常人外周血Treg细胞无调节作用.与无刺激组及健康志愿者PBMC刺激组相比,SLE患者PBMC显著促进UC-MSC TGF-β1 mRNA表达(1.00±0.09,1.95±0.62,4.20±2.34,P<0.05),细胞培养上清TGF-β1水平显著升高.SLE患者血清(5%)促进UC-MSC表达TGF-β1 mRNA(12.19±4.49),显著高于胎牛血清及正常人血清培养组(1.33±0.06,2.53±0.72),P<0.01.TGF-β1 siRNA干扰的UC-MSC对SLE患者外周血Treg细胞无上调作用(SLE PBMC+ TGF-β1 siRNA UC-MSC组2.33%±0.99%,SLE PBMC组1.80%±0.65%,P>0.05).此外,T