目的 探讨17β-雌二醇对大鼠结肠平滑肌细胞(SMC)表达小电导钙激活钾通道3(SK3)的影响及其机制.方法 酶解法分离SD雄性成年大鼠结肠SMC,进行原代培养.细胞免疫荧光双标观察SK3与α-肌动蛋白共表达.取2～3代SMC,不同浓度和不同时间17β-雌二醇刺激后、以反转录实时荧光定量(qRT)-PCR、Western印迹检测SMC表达SK3情况；观察雌激素受体阻断剂ICI182780在17β-雌二醇影响SK3表达中的作用及牛血清白蛋白结合的17β-雌二醇(BSA-E2)、α受体激动剂PPT及β受体激动剂DPN对SK3表达的影响.结果 细胞免疫荧光双标法发现大鼠结肠SMC存在SK3与α-肌动蛋白共表达.不同浓度17β-雌二醇(10、50 nmol/L)刺激结肠SMC后SK3蛋白和mRNA表达量均显著高于溶剂对照组(0.217±0.030、0.321±0.077比0.103±0.063,1.872±0.606、2.967±0.659比0.813±0.202,均P＜0.05),50 nmol/L为体外最大有效浓度；SK3表达的高峰时间为第12和24小时(蛋白表达量分别是0h组的2.91、3.30倍,mRNA表达量分别为3.46、3.37倍,均P ＜0.05).予ICI 182780预处理后加17β-雌二醇,SK3蛋白表达低于17β-雌二醇组(0.111±0.050比0.351±0.084,P＜0.05),而与对照组差异无统计学意义；BSA-E2对SK3的表达无影响.α受体激动剂PPT组SK3蛋白表达与17β-雌二醇组均显著

作者：杨微微；汤玉蓉；王云；李平；王庆娥；林琳

来源：中华医学杂志 2013 年 93卷 30期