目的 观察不同月龄SD大鼠终板软骨中自噬的变化及其意义.方法 取3、6、12月龄SD大鼠的原代终板软骨细胞,分为自然培养组和雷帕霉素组.茜素红染色观察细胞形态,实时聚合酶链反应和免疫印迹检测软骨标志基因Ⅱ型胶原、SOX-9、蛋白多糖转录因子和基质分解酶相关基因MMP-13以及自噬相关基因Beclin-1和LC3基因的表达,单丹磺酰戊二胺(MDC)染色观察细胞的自噬率,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率.结果 茜素红染色显示细胞呈梭形改变,蛋白多糖转录因子、Sox-9和Ⅱ型胶原基因表达呈年龄依赖性降低趋势(P<0.05),提示随年龄增长,终板软骨细胞出现退变;自噬相关基因Beclin-1和LC3在各组终板软骨细胞中均有表达,且呈年龄依赖性降低趋势[(1.0±0.1)比(0.6±0.1),(1.0±0.1)比(0.3±0.2);(1.0±0.2)比(0.4±0.1),(1.0±0.2)比(0.1±0.1)](P<0.05),自噬发生率也呈现明显降低(P<0.05).自然培养组中,细胞存活率呈逐渐降低趋势(P<0.05);与自然培养组相比,雷帕霉素组中各组细胞存活率明显增加(P<0.05).结论 自然增龄大鼠中,终板软骨细胞逐渐出现退变,且存活率降低;上调其自噬水平,可提高细胞存活率,提示呈年龄依赖性降低的自噬活性,可能与椎间盘的自然退变有关.
作者：俞云飞；徐宏光；王弘；张巍；熊寿良；张敏
来源：中华医学杂志 2013 年 93卷 45期
