目的 观察脂多糖预处理对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)内毒素耐受的影响,并探讨其可能机制.方法 将hUCMSCs(1×104个/孔)分别暴露于0、0.1、1.0、10.0、20.0、30.0、40.0及50.0-μg/ml的脂多糖24 h,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;以1μg/ml脂多糖为预处理浓度,50 μg/ml脂多糖为诱导凋亡浓度,核因子(NF)-κB特异性抑制剂PDTC浓度为20 μmol/L,处理时间为20 min.使用Stata软件产生随机数字将hUCMSCs随机分为:对照组(A组);脂多糖诱导组(B组);预处理+脂多糖诱导组(C组);PDTC组(D组);PDTC+预处理+脂多糖诱导组(E组);预处理组(F组);PDTC+预处理组(G组).利用Hoechst 33258染色及流式细胞术观察细胞凋亡,Western印迹法检测NF-κB p65及细胞型Fas相关死亡区域蛋白样白细胞介素-1β转换酶抑制蛋白(c-FLIP)的表达.结果 0、0.1、1.0、10.0、20.0、30.0、40.0及50.0μg/ml脂多糖刺激组的细胞存活率分别为:100%、(117.0±8.8)%、(134.7±6.9)%、(105.3±8.3)%、(99.2±8.3)%、(84.2±9.3)%、(66.4±6.6)%和(59.2±8.0)%;与0 μg/ml组比较,1.0 μg/ml组hUCMSCs的存活率明显提高(P=0.004),而40.0、50.0 μg/ml组细胞存活率显著降低(P =0.005、0.002).A组hUCMSCs染色质分布均匀,为弥散均匀的低强度荧光;B组细
作者:侯玉森;柴家科;刘玲英;郁永辉;段红杰;胡泉;褚万立;马丽
来源:中华医学杂志 2014 年 94卷 12期