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目的 探讨低氧条件下人角膜上皮对棘阿米巴易感性的调控机制.方法 培养永生化人角膜上皮细胞(THCEs),随机分为低氧(1%O2)棘阿米巴刺激组和常氧(21%O2)棘阿米巴刺激组(1×106/ml).收集刺激细胞检测Toll样受体4(TLR4)及其通路分子髓样分化因子88(MyD88)、核因子κB(NF-κB),以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素8(IL-8)和干扰素β(IFN-β) mRNA的表达水平.同时检测TLR4、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化IκBα (p-IκBα)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)的蛋白表达水平.收取上清检测相关炎性因子IL-8、TNF-α和IFN-β的表达水平.结果 低氧条件下棘阿米巴诱导的TLR4、MyD88、NF-κB、TNF-α、IFN-β及IL-8 mRNA表达相较常氧条件下分别下调47%、41%、45%、53%、36%及50%,细胞培养上清TNF-α、IFN-β及IL-8蛋白表达分别下调46%、28%及35%.同时,低氧明显抑制p-IκBα和p-ERK1/2蛋白表达(分别下调56%、55%),并促进IκBα的表达,与常氧棘阿米巴刺激组比较差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 低氧抑制人角膜上皮细胞对棘阿米巴刺激引起的炎性反应,该反应可能是通过抑制TLR4及其信号通路来完成的.

作者:庞鵾鹏;潘虹

来源:中华医学杂志 2016 年 96卷 40期

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作者:
庞鵾鹏;潘虹
来源:
中华医学杂志 2016 年 96卷 40期
标签:
细胞低氧 Toll样受体4 角膜炎,棘阿米巴 上皮,角膜 细胞因子类 Cell hypoxia Toll-like receptor 4 Acanthamoeba keratitis Epithelium,corneal Cytokines
目的 探讨低氧条件下人角膜上皮对棘阿米巴易感性的调控机制.方法 培养永生化人角膜上皮细胞(THCEs),随机分为低氧(1%O2)棘阿米巴刺激组和常氧(21%O2)棘阿米巴刺激组(1×106/ml).收集刺激细胞检测Toll样受体4(TLR4)及其通路分子髓样分化因子88(MyD88)、核因子κB(NF-κB),以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素8(IL-8)和干扰素β(IFN-β) mRNA的表达水平.同时检测TLR4、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化IκBα (p-IκBα)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)的蛋白表达水平.收取上清检测相关炎性因子IL-8、TNF-α和IFN-β的表达水平.结果 低氧条件下棘阿米巴诱导的TLR4、MyD88、NF-κB、TNF-α、IFN-β及IL-8 mRNA表达相较常氧条件下分别下调47%、41%、45%、53%、36%及50%,细胞培养上清TNF-α、IFN-β及IL-8蛋白表达分别下调46%、28%及35%.同时,低氧明显抑制p-IκBα和p-ERK1/2蛋白表达(分别下调56%、55%),并促进IκBα的表达,与常氧棘阿米巴刺激组比较差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 低氧抑制人角膜上皮细胞对棘阿米巴刺激引起的炎性反应,该反应可能是通过抑制TLR4及其信号通路来完成的.