目的 制备HepG2细胞与树突状细胞(DC)融合瘤苗,检测其体外诱导的特异性抗肝癌细胞HepG2的免疫效应.方法 以密度梯度离心法分离健康志愿者外周血中的单个核细胞(PBMC),以重组人粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素4(rhIL-4)体外诱导培养DC,同时利用重组人白细胞介素2(rhIL-2)培养获得同源T淋巴细胞;采用聚乙二醇(PEG)诱导DC和HepG2融合,免疫荧光染色观察融合细胞状态,并通过流式细胞术检测融合率;使用ELISA法检测融合细胞分泌白细胞介素12(IL-12)的能力,荧光衰减法检测融合细胞刺激T淋巴细胞增殖的能力;采用ELISPOT法检测融合细胞诱导的细胞毒T淋巴细胞(CTL)释放干扰素(IFN-γ)的能力;采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测融合细胞刺激产生的CTL体外特异性杀伤HepG2肝癌细胞的效果.以单纯DC、HepG2和DC混合细胞(mix DC,mDC)作为对照.结果 HepG2/DC融合瘤苗体外融合率为54.5％,融合瘤苗表面高表达DC成熟分子,分别为HLA-ABC 96.7％,HLA-DR 94.5％,CD80 93.2％,CD83 90.4％,CD86 95.1％,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01);融合瘤苗刺激T淋巴细胞增殖能力显著强于对照组(P＜0.01),其分泌IL-12的水平也高于对照组(P＜0.05);融合瘤苗诱导的CTL分泌IFN-γ的能力显著增强,特异性CTL在效靶比为

作者：庞业滨；崔碧玉；何坚；黄馨萍；梁伟；黎乐群；罗小玲

来源：中华医学杂志 2017 年 97卷 7期