目的 观察A20 基因表达下调对鼻咽癌细胞体内外增殖、侵袭及转移能力的影响.方法 筛选并建立Tet-on基因表达系统诱导A20沉默的鼻咽癌肝转移亚系5-8F-H3细胞系,实时荧光定量PCR、Western印迹检测干扰效率;CCK8法、平板克隆形成实验检测A20对5-8F-H3增殖能力的影响;流式细胞仪检测细胞周期;侵袭小室检测A20对5-8F-H3侵袭能力的影响;裸鼠皮下成瘤实验和体内转移实验检测经强力霉素(DOX)诱导A20基因表达沉默对5-8F-H3在体内增殖及转移能力的影响.结果 可诱导沉默 A20 的鼻咽癌细胞5-8F-H3/A20-shRNA 构建成功.5-8F-H3/A20-shRNA经DOX诱导后,A20基因mRNA及蛋白的表达均下调(均P<0.01);CCK8法(F=18.542,P=0.003)、平板克隆形成实验(F =40.080,P <0.001)及流式细胞术检测实验(F =7.398,P =0.024)结果显示A20基因表达下调明显抑制5-8F-H3在体外增殖能力;侵袭小室检测结果显示A20基因表达下调抑制5-8F-H3在体外侵袭能力(F=26.157,P<0.001).裸鼠皮下成瘤实验和体内转移实验结果显示A20基因表达下调明显抑制5-8F-H3在裸鼠体内的成瘤和转移能力.结论 A20与鼻咽癌多种恶性生物学行为密切相关,有望成为鼻咽癌潜在治疗靶点.
作者:刘芳;谢卫兵;周来勇;柳玉红;方唯意;姚开泰
来源:中华医学杂志 2018 年 98卷 24期