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目的建立以质粒DNA为抗原的检测血清抗双链DNA (ds-DNA)抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法及探讨其临床应用价值.方法将原核表达载体质粒pBV220用碱裂解法提取纯化DNA后,按1∶ 150稀释包被在多聚-L-赖氨酸处理的微孔板上,以辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)为酶标记物,建立检测血清抗双链DNA抗体的ELISA方法.并以短膜虫为底物的间接免疫荧光法(IIF)为参比方法,对64例系统性红斑狼疮(SLE)、8例混合性结缔组织病、17例类风湿性关节炎患者的血清抗ds-DNA抗体进行对比检测.结果紫外分光法于波长260 nm测DNA浓度为1.54 g/L.ELISA抗ds-DNA法和IIF法检测3组患者阳性率分别为23.4

作者:熊华;李晓军;齐名

来源:中华检验医学杂志 2003 年 26卷 6期

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作者:
熊华;李晓军;齐名
来源:
中华检验医学杂志 2003 年 26卷 6期
标签:
质粒DNA 酶联免疫吸附试验 抗双链DNA抗体
目的建立以质粒DNA为抗原的检测血清抗双链DNA (ds-DNA)抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法及探讨其临床应用价值.方法将原核表达载体质粒pBV220用碱裂解法提取纯化DNA后,按1∶ 150稀释包被在多聚-L-赖氨酸处理的微孔板上,以辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)为酶标记物,建立检测血清抗双链DNA抗体的ELISA方法.并以短膜虫为底物的间接免疫荧光法(IIF)为参比方法,对64例系统性红斑狼疮(SLE)、8例混合性结缔组织病、17例类风湿性关节炎患者的血清抗ds-DNA抗体进行对比检测.结果紫外分光法于波长260 nm测DNA浓度为1.54 g/L.ELISA抗ds-DNA法和IIF法检测3组患者阳性率分别为23.4