目的 通过对未使用碳青霉烯类药物治疗患者中分离的亚胺培南耐药铜绿假单胞菌的分型分析,探讨铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药性产生和传播的危险因素.方法 2006年4月至2008年3月西安交通大学医学院附属三二○一医院从未使用碳青霉烯治疗的住院患者中分离出37株亚胺培南不敏感铜绿假单胞菌,采用琼脂稀释法测定了菌株对11种抗生素的敏感性,并通过肉汤稀释法测试了外排泵抑制剂(PAβN)对亚胺培南和美罗培南耐药性的影响.通过PCR方法对金属酶编码基因及外膜孔蛋白编码基因oprD2进行了扩增和测序,用实时定量PCR( RT-PCR)方法对oprD2和ampC基因的表达水平进行测定,采用脉冲场电泳技术(PFGE)分析菌株的同源性.结果 37例患者中,体内分离出亚胺培南不敏感铜绿假单胞菌之前,使用两种或两种以上抗生素治疗的16例患者平均抗生素使用时间为(20.0±9.5)d,显著长于仅使用一种抗生素治疗的21例患者[(12.6±4.4)d;t=-2.9004,P<0.01].在37株菌中,32株对3种以上抗生素耐药;仅有1株菌检出金属酶(IMP-9型),但该菌金属酶表型为阴性;29株菌的oprD2基因上均在同一位点正向插入序列ISpa1328;oprD2表达量检测有35株菌为零表达,2株菌过度表达ampC酶;37株菌PFGE分型分为6个脉冲型,其中26株菌为C2型;所有37株菌在外排泵抑制剂作用
作者:辜依海;朱啸;崔生辉;张军;周庆元;李景云;柴佳
来源:中华检验医学杂志 2012 年 35卷 8期