目的 建立同位素稀释超高效液相色谱串联质谱(ID-UPLC/MS/MS)方法测定血清25羟维生素D2[25(OH)D2]和25羟维生素D3 [25(OH) D3],以用于常规临床实验室评价维生素D含量.方法 方法学建立及评价.2013年5月至8月征集的500名北京健康志愿者,采集血清用于建立参考区间.以稳定同位素标记的25 (OH) D2-D3和25 (OH) D3-D3作内标,首先用硫酸锌溶液和甲醇溶液沉淀血清蛋白、正己烷震荡提取、离心后吸取上清液、氮气挥干,再用流动相重组,应用ID-UPLC/MS/MS技术分析;质谱采用正离子电喷雾离子化的多离子反应监测模式,25(OH) D2和25(OH)D3定量离子通道选择质荷比(m/z)分别为413.3→395.3和401.4→383.4;内标25(OH) D2-D3和25 (OH) D3-D3离子通道m/z分别为416.3→398.3和404.4→386.4.以标准品制作标准曲线,结合稳定同位素内标法定量,建立ID-UPLC/MS/MS法快速测定25(OH)D2和25(OH)D3的方法.用含4个水平25(OH)D3的混合人血和3个水平25 (OH) D2和25(OH)D3的质控品进行3次重复分析,每次每种样本重复分析3份,以考察方法的精密度,同时评价血清样本添加不同浓度标准品的加样回收率.初步建立北京人群血清25(OH)D参考范围,亚组间差异采用独立样本t检验.结果 用ID-UPLC/MS/MS法在本实验条件下可同时快速检测血清25(OH)D2和25(OH) D

作者：禹松林；韩建华；张江涛；张殿喜；陈雨；程倩；苏薇；邱玲

来源：中华检验医学杂志 2014 年 37卷 8期