目的:研究我国临床肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对黏菌素的耐药机制。方法回顾性收集2011至2014年我国11个城市15家教学医院中非重复的964株肺炎克雷伯菌和1389株大肠埃希菌。采用琼脂稀释法测定抗菌药物敏感性。 PCR和基因测序检测黏菌素MIC>2 mg/L的菌株mcr-1基因携带率和黏菌素耐药相关基因mgrB、pmrB、phoQ是否存在基因突变。采用实时荧光定量PCR方法比较肺炎克雷伯菌黏菌素耐药组(黏菌素MIC值>2 mg/L,n=6)和黏菌素敏感组(黏菌素MIC值≤2 mg/L,n=8)二元调控基因pmrB、pmrC、pmrD、pmrK和pmrE的相对表达量;采用RT-qPCR比较大肠埃希菌黏菌素耐药组(n=23)和敏感组(n=24)pmrA、pmrB、pmrC、phoP和phoQ基因的相对表达量。采用接合试验检测携带mcr-1质粒的可转移性。采用SPSS16.0软件进行统计分析,以P<0.05为差异具有统计学意义。结果肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌对黏菌素耐药率分别为0.62%(6/964)和1.66%(23/1389)。黏菌素耐药的2种菌中,mgrB基因均无突变;6株黏菌素耐药肺炎克雷伯菌phoQ基因均无突变,5株pmrB基因发生点突变。黏菌素耐药大肠埃希菌pmrB和phoQ基因均发生1~4个氨基酸位点突变。肺炎克雷伯菌耐药pmrB、pmrC、pmrD、pmrK和pmrE基因的相对表达量较敏感组差
作者:齐小梅;王晓娟;陈宏斌;李曙光;赵春江;王启;王占伟;张雅薇;王辉
来源:中华检验医学杂志 2016 年 39卷 8期