目的 建立人胚胎干细胞无动物源性饲养层培养方法,同时对长时间体外培养的人胚胎干细胞核型变化进行分析.方法 人胚胎干细胞系HUES4细胞分别培养于小鼠胚胎成纤维细胞和人包皮成纤维细胞饲养层,并对其干细胞特性进行鉴定;在培养传代过程中,收获P27、P34、P41和P44细胞进行染色体核型分析, P27细胞还进行DNA短串联重复序列多态性分析.结果 生长于人包皮成纤维细胞饲养层的HUES4细胞碱性磷酸酶染色以及SSEA-4、TRA-1-60和TRA-1-81抗原阳性,SSEA-1抗原阴性.所检测的4代细胞中均见46,XY/46,XY,t(9;15)(q22;q26)核型嵌合现象,且异常核型百分比随传代次数增加有上升的趋势.结论 培养人胚胎干细胞的饲养层细胞可由无动物源性的饲养层细胞替代;长期体外培养有增加细胞染色体核型异常的风险.
作者：张文红；孙筱放；孔舒；蒋永华；郑育红；银益飞
来源：中华医学遗传学杂志 2007 年 24卷 3期
