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目的:探讨下调miR-488靶向Jag1对缺氧复氧心肌H9c2细胞损伤的影响。方法:构建缺氧复氧心肌H9c2细胞损伤模型,转染miR-488 inhibitor。分别用CCK-8法和流式细胞术检测各组细胞的增殖的凋亡,分别用试剂盒检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)和过氧化氢酶(catalase,CAT)的水平,用Western印迹检测Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)蛋白表达的差异。预测miR-488的靶基因,并用荧光素酶报告系统鉴定二者的靶向关系。在心肌H9c2细胞中共转染miR-488 inhibitor、Jag1 siRNA,给予缺氧复氧处理,检测细胞增殖、凋亡和LDH、SOD、MDA、CAT水平以及Bax、Bcl-2蛋白表达。结果:缺氧复氧心肌H9c2细胞中miR-488表达升高,细胞增殖活性降低,凋亡增多,Bax蛋白表达升高,Bcl-2表达降低,MDA水平升高,CAT、SOD水平降低,细胞培养液上清中LDH升高。转染miR-488 inhibitor使经缺氧复氧处理的心肌H9c2细胞中miR-488表达降低,细胞增殖活性升高,凋亡减少,Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高,MDA水平降低,CAT、SOD水平升高,培养液上清中LDH水平降低。下调m

作者:赵荫涛;裴小鑫;刘源;徐亚威;彭猛;杨海波

来源:中华医学遗传学杂志 2021 年 38卷 12期

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作者:
赵荫涛;裴小鑫;刘源;徐亚威;彭猛;杨海波
来源:
中华医学遗传学杂志 2021 年 38卷 12期
标签:
缺氧复氧 心肌细胞 miR-488 凋亡 氧化损伤 Hypoxia and reoxygenation Cardiomyocytes miR-488 Apoptosis Oxidative damage
目的:探讨下调miR-488靶向Jag1对缺氧复氧心肌H9c2细胞损伤的影响。方法:构建缺氧复氧心肌H9c2细胞损伤模型,转染miR-488 inhibitor。分别用CCK-8法和流式细胞术检测各组细胞的增殖的凋亡,分别用试剂盒检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)和过氧化氢酶(catalase,CAT)的水平,用Western印迹检测Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)蛋白表达的差异。预测miR-488的靶基因,并用荧光素酶报告系统鉴定二者的靶向关系。在心肌H9c2细胞中共转染miR-488 inhibitor、Jag1 siRNA,给予缺氧复氧处理,检测细胞增殖、凋亡和LDH、SOD、MDA、CAT水平以及Bax、Bcl-2蛋白表达。结果:缺氧复氧心肌H9c2细胞中miR-488表达升高,细胞增殖活性降低,凋亡增多,Bax蛋白表达升高,Bcl-2表达降低,MDA水平升高,CAT、SOD水平降低,细胞培养液上清中LDH升高。转染miR-488 inhibitor使经缺氧复氧处理的心肌H9c2细胞中miR-488表达降低,细胞增殖活性升高,凋亡减少,Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高,MDA水平降低,CAT、SOD水平升高,培养液上清中LDH水平降低。下调m