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目的 构建铜绿假单胞菌(PA)小RNA phrs基因缺失株与回复株,观察phrs在铜绿假单胞菌生长和生物膜形成中的作用.方法 应用λ-Red重组系统构建phrs缺失株PA27853△phrs、回复株PA27853 △phrs-comp和对照株PA27853 △phrs-control,绘制细菌生长曲线,观察phrs对细菌生长的影响;荧光染色法定量分析细菌生物膜形成能力变化.结果 成功获得phrs基因缺失株和回复株,RT-PCR结果显示,phrs基因在缺失突变株中不表达,在回复株中重新表达;phrs不影响细菌的生长速度,基因敲除后细菌生物膜形成能力明显下降,而回复株则能形成明显生物膜.结论 利用λ-Red重组技术成功构建出PA25783△phrs,phrs对细菌生物膜的形成具有重要的调控作用.

作者:徐凤琴;黄松音;莫红平;曾俏君;孙婧;周春霞;李红玉

来源:中华医院感染学杂志 2017 年 27卷 10期

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作者:
徐凤琴;黄松音;莫红平;曾俏君;孙婧;周春霞;李红玉
来源:
中华医院感染学杂志 2017 年 27卷 10期
标签:
铜绿假单胞菌 生物膜 小RNA Pseudomonas aeruginosa Biofilm small RNA
目的 构建铜绿假单胞菌(PA)小RNA phrs基因缺失株与回复株,观察phrs在铜绿假单胞菌生长和生物膜形成中的作用.方法 应用λ-Red重组系统构建phrs缺失株PA27853△phrs、回复株PA27853 △phrs-comp和对照株PA27853 △phrs-control,绘制细菌生长曲线,观察phrs对细菌生长的影响;荧光染色法定量分析细菌生物膜形成能力变化.结果 成功获得phrs基因缺失株和回复株,RT-PCR结果显示,phrs基因在缺失突变株中不表达,在回复株中重新表达;phrs不影响细菌的生长速度,基因敲除后细菌生物膜形成能力明显下降,而回复株则能形成明显生物膜.结论 利用λ-Red重组技术成功构建出PA25783△phrs,phrs对细菌生物膜的形成具有重要的调控作用.