目的构建靶向人黑色素瘤的选择复制性腺病毒,观察其对人黑色素瘤细胞的特异性杀伤作用.方法以PCR克隆的方法分别获得腺病毒E1区、鼠酪氨酸酶启动子和增强子DNA片段;用基因重组的方法构建靶向人黑色素瘤的选择复制性腺病毒的穿梭载体;用同源重组的方法获得靶向人黑色素瘤的选择复制性腺病毒AdhepE1;以低剂量AdhepE1分别攻击人黑色素瘤细胞系SK-Mel-1和人肝细胞癌细胞系HepG2,观察细胞形态变化及计算存活细胞数;用RT-PCR检测E1A的表达,以证实AdhepE1的特异性复制.结果经PCR证实,获得了靶向人黑色素瘤的选择复制性腺病毒AdhepE1,人黑色素瘤细胞系SK-Mel-1对AdhepE1的裂解杀伤敏感,而人肝细胞癌细胞系HepG2则不敏感.RT-PCR的结果提示,AdhepE1在人黑色素瘤细胞中可特异地复制.结论AdhepE1对人黑色素瘤细胞具有良好的靶向性.
作者:谢庆军;陆应麟;陈泽建;张金强;陈惠华;凌贤龙;吕品;杜芝燕;徐元基
来源:中华肿瘤杂志 2003 年 25卷 5期