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目的从两株同源但转移能力不同的人肺巨细胞癌细胞株中分离并鉴定差异表达基因.方法应用抑制消减杂交(SSH)技术,对来源相同、转移能力不同的人肺巨细胞癌细胞株PLA-801C和PLA-801D进行了两次实验.第1次SSH实验以PLA-801C株为实验方,第2次实验以PLA-801D株为实验方.将获得差异表达的片段点在氨基化的玻片上做成基因芯片,利用荧光标记的探针与芯片杂交,选取差异表达克隆,并利用RNA狭缝杂交或Northern杂交对若干片段进行验证.结果在低转移肺巨细胞癌细胞株中,高表达的序列有16条;在高转移肺巨细胞癌细胞株中,高表达的序列有79条.测序后经过同源性分析,大部分序列均与已知序列高度同源,主要编码以下几类蛋白:(1)细胞因子及其受体相关蛋白;(2)激酶及其相关蛋白;(3)其他蛋白,包括酶类、热休克蛋白、受体蛋白、细胞骨架蛋白、线粒体蛋白和癌基因编码产物等;(4)一些未知功能的蛋白或是从核酸序列推出来的假想蛋白.结论 HSP70、AXL受体酪氨酸激酶和14-3-3ζ等多种已知基因表达情况的改变,可能影响肺癌的转移过程,此外还发现了一些可能的肿瘤转移相关新基因.

作者:张金强;王妍;王涛;杜芝燕;徐元基;陆应麟

来源:中华肿瘤杂志 2004 年 26卷 10期

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作者:
张金强;王妍;王涛;杜芝燕;徐元基;陆应麟
来源:
中华肿瘤杂志 2004 年 26卷 10期
标签:
肺肿瘤 肿瘤转移 抑制消减杂交技术 基因芯片
目的从两株同源但转移能力不同的人肺巨细胞癌细胞株中分离并鉴定差异表达基因.方法应用抑制消减杂交(SSH)技术,对来源相同、转移能力不同的人肺巨细胞癌细胞株PLA-801C和PLA-801D进行了两次实验.第1次SSH实验以PLA-801C株为实验方,第2次实验以PLA-801D株为实验方.将获得差异表达的片段点在氨基化的玻片上做成基因芯片,利用荧光标记的探针与芯片杂交,选取差异表达克隆,并利用RNA狭缝杂交或Northern杂交对若干片段进行验证.结果在低转移肺巨细胞癌细胞株中,高表达的序列有16条;在高转移肺巨细胞癌细胞株中,高表达的序列有79条.测序后经过同源性分析,大部分序列均与已知序列高度同源,主要编码以下几类蛋白:(1)细胞因子及其受体相关蛋白;(2)激酶及其相关蛋白;(3)其他蛋白,包括酶类、热休克蛋白、受体蛋白、细胞骨架蛋白、线粒体蛋白和癌基因编码产物等;(4)一些未知功能的蛋白或是从核酸序列推出来的假想蛋白.结论 HSP70、AXL受体酪氨酸激酶和14-3-3ζ等多种已知基因表达情况的改变,可能影响肺癌的转移过程,此外还发现了一些可能的肿瘤转移相关新基因.