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目的研究在不同处理因子作用下,外源基因ER β的表达对MCF-7乳腺癌细胞系生长特性的影响.方法利用lipofectamine 2000将ER β真核表达载体pCDNA3-ER β导入MCF-7乳腺癌细胞系.采用含雌激素应答元件(ERE)的荧光素酶报告基因及Western blot方法,检测转染细胞中ER β的转录活性和蛋白表达水平,筛选阳性克隆.以亲本细胞MCF-7及转染空载体质粒pCDNA3的MCF-7细胞为对照,在雌激素E2和雌激素受体拮抗剂4-OHT作用下观察细胞的生长特点.结果在转染ER β基因的MCF-7细胞系中,ER β的转录激活活性明显升高;Western blot检测证实,ER β的蛋白表达水平显著增高.在无处理因子情况下,外源基因ER β在MCF-7细胞系中的表达对细胞的形态及生长速度无明显影响.与亲本细胞MCF-7及转染空载体质粒的MCF-7细胞相比,稳定转染ER β的MCF-7细胞对雌激素的敏感性下降,但对4-OHT处理的敏感性无明显减少.结论外源性ER β基因在MCF-7乳腺癌细胞中的稳定表达不增加对4-OHT的耐药性,但使之对雌激素的敏感性下降.

作者:朱建华;叶棋浓;宋三泰;江泽飞;严景华;郝春芳;黄翠芬

来源:中华肿瘤杂志 2006 年 28卷 2期

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作者:
朱建华;叶棋浓;宋三泰;江泽飞;严景华;郝春芳;黄翠芬
来源:
中华肿瘤杂志 2006 年 28卷 2期
标签:
外源基因ERβ MCF-7 乳腺癌细胞系
目的研究在不同处理因子作用下,外源基因ER β的表达对MCF-7乳腺癌细胞系生长特性的影响.方法利用lipofectamine 2000将ER β真核表达载体pCDNA3-ER β导入MCF-7乳腺癌细胞系.采用含雌激素应答元件(ERE)的荧光素酶报告基因及Western blot方法,检测转染细胞中ER β的转录活性和蛋白表达水平,筛选阳性克隆.以亲本细胞MCF-7及转染空载体质粒pCDNA3的MCF-7细胞为对照,在雌激素E2和雌激素受体拮抗剂4-OHT作用下观察细胞的生长特点.结果在转染ER β基因的MCF-7细胞系中,ER β的转录激活活性明显升高;Western blot检测证实,ER β的蛋白表达水平显著增高.在无处理因子情况下,外源基因ER β在MCF-7细胞系中的表达对细胞的形态及生长速度无明显影响.与亲本细胞MCF-7及转染空载体质粒的MCF-7细胞相比,稳定转染ER β的MCF-7细胞对雌激素的敏感性下降,但对4-OHT处理的敏感性无明显减少.结论外源性ER β基因在MCF-7乳腺癌细胞中的稳定表达不增加对4-OHT的耐药性,但使之对雌激素的敏感性下降.