目的 探讨一种新的CD44基因变异体(CD44v17)对人乳腺癌细胞株MCF-7侵袭能力的影响及其机制.方法 以人乳腺癌耐阿霉素细胞株(MCF-7/ADR)cDNA为模板,采用聚合酶链反应(PCR)扩增目的片段,将其T-A克隆后,进行测序;构建CD44v17质粒真核表达载体(pcDNA3.1-CD44v17);应用脂质体转染法将pcDNA3.1-CD44v17转染入MCF-7细胞中,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及明胶酶谱法测定转染细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达;Transwell法检测CD44v17对MCF-7细胞的侵袭力;Western blot检测胞外信号调节蛋白激酶(ERK)及磷酸化蛋白激酶(p-ERK)变化.结果 限制性内切酶消化证实,重组载体已正确克隆;DNA序列分析显示,CD44v17包含CD44基因1～4号外显子、16～17号外显子、18号外显子1～205位碱基(GeneBank NO.FJ216964).MCF-7细胞转染peDNA3.1-CD44v17后,CD44 mRNA表达量和蛋白表达率分别为0.92±0.22和(70.0±2.5)
作者：房新建；许文林；弓晋灵；陈琛；方莉莉；陈巧云
来源：中华肿瘤杂志 2010 年 32卷 1期
