目的：探讨靶向肝癌干细胞单克隆抗体的生物学特征及其联合顺铂治疗肝癌的疗效。方法采用无血清悬浮培养法和PKH26染色法确定肝癌Bel7402?V3细胞中存在肿瘤干细胞。细胞免疫荧光法检测单克隆抗体15D2识别的抗原蛋白与PKH26阳性细胞及上皮特异性抗原（ ESA）在Bel7402?V3细胞中的表达情况。无血清悬浮培养法检测流式细胞术分选出的15D2阳性细胞的自我更新能力以及15D2对Bel7402?V3细胞自我更新能力的影响。 CCK8法检测15D2对细胞顺铂耐药能力的影响。裸鼠体内治疗实验分析15D2联合顺铂对Bel7402?V3移植瘤生长的抑制作用。结果Bel7402?V3细胞无血清悬浮培养11 d后形成的细胞球体中存在单个PKH26阳性细胞。细胞免疫荧光显示，单克隆抗体15D2识别的抗原分子能与PKH26和ESA在Bel7402?V3细胞上共定位。15D2阳性细胞和15D2阴性细胞的体外成球率分别为（30．4±3．4）％和（8．8±1．8）％，差异有统计学意义（ P＜0．05）。15D2阳性细胞具有更高的顺铂耐药性，15D2阳性细胞和15D2阴性细胞的半数抑制浓度（IC50）分别为1．014和0．365μmol／L。单克隆抗体15D2能够显著抑制Bel7402?V3细胞的无血清成球，抑制率为37．5％。经15D2处理后的Bel7402?V3细胞，顺铂耐药能力明显下降，其IC50为0．211μg／ml，而对照组的
作者：何永燕；遇珑；容雁；孙立新；孙力超；杨治华；冉宇靓；李力
来源：中华肿瘤杂志 2016 年 38卷 5期
