目的:探讨从胃癌干细胞中提取伴侣分子?抗原肽的方法及其免疫功能。方法低温超声裂解筛选胃癌干细胞和胃癌细胞,经盐析粗提蛋白及透析后,采用十二烷基硫酸钠?聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS?PAGE)分析伴侣分子?抗原肽表达量,采用溴化氰活化琼脂糖凝胶4B亲和层析分离、纯化伴侣分子?抗原肽,采用反向高压液相色谱、SDS?PAGE和Western blot法进行蛋白纯度分析,采用淋巴细胞增殖实验和细胞毒活性实验检测伴侣分子?抗原肽的免疫活性。结果成功制备并鉴定胃癌干细胞的伴侣分子?抗原肽,主要组分为HSP60?抗原肽、HSP70?抗原肽、HSP90?抗原肽和HSP110?抗原肽。0.75μg HSP70?抗原肽、1.00μg HSP70?抗原肽和1.00μg HSP90?抗原肽对淋巴细胞有明显的增殖作用,其A490值分别为0.26±0.03、0.45±0.05和0.32±0.04,而相应剂量的 HSP60?抗原肽和HSP110?抗原肽不能激活淋巴细胞。1.00μg HSP70?抗原肽组和1.00μg HSP70组的细胞杀伤率分别为(45.0±2.0)%和(16.0±2.0)%,差异有统计学意义(P=0.012)。1.00μg HSP90?抗原肽组和1.00μg HSP90组的细胞杀伤率分别为(36.0±5.0)%和(13.0±4.0)%,差异有统计学意义(P=0.048)。结论胃癌细胞中伴侣分子?抗原肽含量极低,而胃癌干
作者:姜贻乾;郭庆敏;徐小平;梁军才;何一扬;安素红;苏芳;李朝阳;黄常新
来源:中华肿瘤杂志 2017 年 39卷 2期