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目的:探讨重组人胰岛素样生长因子-Ⅰ(rhIGF-Ⅰ)和重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)单独或联合应用对MC 3T3-E1和NIH 3T3细胞增殖、分化和钙化的影响.方法:单独或联合应用不同浓度rhIGF-Ⅰ和rhBMP-2作用于小鼠成骨样细胞株MC 3T3-E1和小鼠成纤维细胞株NIH 3T3,采用四唑盐比色法(MTT)和流式细胞技术检测细胞增殖,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测细胞分化,放射免疫法检测细胞分泌的骨钙素水平(OC),以及Von kossa钙化染色法观察细胞的钙化.结果:1~50 ng/ml rhIGF-Ⅰ作用于MC 3T3-E1细胞或5~75 ng/ml rhIGF-Ⅰ作用于NIH 3T3细胞后,均能显示明显的促细胞增殖作用(P<0.01),使S期细胞百分率升高、G1期细胞百分率减少,以及使胞内ALP活性、钙化面积百分比增高(P<0.05).10~100 ng/ml rhBMP-2也可促进MC 3T3-E1 和NIH 3T3细胞的增殖作用(P<0.01),使S期细胞百分率升高、G1期细胞百分率减少,并使2种细胞ALP活性、钙化面积百分比升高(P<0.05).各浓度rhIGF-Ⅰ或rhBMP-2对MC 3T3-E1及NIH 3T3细胞作用8 h、24 h和48 h的MTT检测结果相似.rhIGF-Ⅰ和rhBMP-2联合作用后,对2种细胞的促增殖、增强ALP活性、促钙化的作用均较各自单独作用更为明显(P<0.05).单独或联合应用不同浓度rhIGF-Ⅰ和rhBMP-2对细胞分泌的OC水平均无显著性差异(P>

作者:金冬梅;陈莉丽;严杰

来源:浙江大学学报(医学版) 2006 年 35卷 1期

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作者:
金冬梅;陈莉丽;严杰
来源:
浙江大学学报(医学版) 2006 年 35卷 1期
标签:
成纤维细胞 成骨细胞 胰岛素样生长因子Ⅰ/代谢 骨形态发生蛋白质类 骨钙素/代谢 细胞分化
目的:探讨重组人胰岛素样生长因子-Ⅰ(rhIGF-Ⅰ)和重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)单独或联合应用对MC 3T3-E1和NIH 3T3细胞增殖、分化和钙化的影响.方法:单独或联合应用不同浓度rhIGF-Ⅰ和rhBMP-2作用于小鼠成骨样细胞株MC 3T3-E1和小鼠成纤维细胞株NIH 3T3,采用四唑盐比色法(MTT)和流式细胞技术检测细胞增殖,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测细胞分化,放射免疫法检测细胞分泌的骨钙素水平(OC),以及Von kossa钙化染色法观察细胞的钙化.结果:1~50 ng/ml rhIGF-Ⅰ作用于MC 3T3-E1细胞或5~75 ng/ml rhIGF-Ⅰ作用于NIH 3T3细胞后,均能显示明显的促细胞增殖作用(P<0.01),使S期细胞百分率升高、G1期细胞百分率减少,以及使胞内ALP活性、钙化面积百分比增高(P<0.05).10~100 ng/ml rhBMP-2也可促进MC 3T3-E1 和NIH 3T3细胞的增殖作用(P<0.01),使S期细胞百分率升高、G1期细胞百分率减少,并使2种细胞ALP活性、钙化面积百分比升高(P<0.05).各浓度rhIGF-Ⅰ或rhBMP-2对MC 3T3-E1及NIH 3T3细胞作用8 h、24 h和48 h的MTT检测结果相似.rhIGF-Ⅰ和rhBMP-2联合作用后,对2种细胞的促增殖、增强ALP活性、促钙化的作用均较各自单独作用更为明显(P<0.05).单独或联合应用不同浓度rhIGF-Ⅰ和rhBMP-2对细胞分泌的OC水平均无显著性差异(P>