[目的]探讨大蒜素对体外培养的脑胶质瘤C6细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用及其机制。[方法]培养脑胶质瘤C6细胞至对数生长期,不同浓度大蒜素作用下,于倒置显微镜及Hoechst33258荧光染色显微镜下观察C6细胞形态学变化;四甲基偶氮噻唑蓝法(tetrazolium salt colorimetry, MTT)检测不同浓度大蒜素对C6细胞增殖的影响并计算抑制率;钙依赖性磷脂结合蛋白-荧光素/碘化丙啶双染法(Annexin V-fluorescein/propidium iodide,AnnexinV-FITC/PI)检测凋亡率;流式细胞术(flow cytometry, FCM)检测细胞周期;蛋白质印迹法(western blotting,WB)检测Bax、Bcl-2基因的表达。[结果]大蒜素作用C6细胞24h后,于倒置显微镜观察可见C6细胞生长明显抑制,部分细胞皱缩变形,出现成泡现象;Hoechst33258荧光染色显微镜下观察发现凋亡的细胞,细胞的体积变大,核固缩、凝集,核染色质边集,出现浓染致密的颗粒块荧光信号,并随着大蒜素浓度增加表现越加明显。不同浓度(5、10、20、40、80μg·mL-1)大蒜素作用C6细胞(24h、48h、72h)后,细胞增殖受到抑制,与0μg·mL-1大蒜素比较差异有统计学意义(P<0.01);同一浓度大蒜素作用C6细胞48h、72h后,与24h比,差异有统计学意义(P<0.01)。随着大蒜素浓度的增加,C6细胞
作者:方伟;陈景南;范成谱;杜杭根
来源:浙江中医药大学学报 2016 年 40卷 10期