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[目的]探讨龟鹿二仙胶对化疗诱导的骨髓造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)衰老的影响及其相关机制.[方法]30只雄性昆明小鼠右腋部皮下注射肝癌细胞株H22细胞悬液0.1mL,细胞浓度为1.0×107个/mL,建立荷瘤小鼠模型.将荷瘤小鼠随机分为3组(对照组、模型组、龟鹿二仙胶组),对照组小鼠腹腔注射0.9%氯化钠溶液0.2mL,1次/d,连续3d(d1~3);其余两组小鼠均腹腔注射环磷酰胺100mg/(kg·d),1次/d,连续3d(d1~3).龟鹿二仙胶组小鼠同时给予龟鹿二仙胶9.5g/(kg·d)灌胃,1次/d,共9d(d1~9);对照组和模型组同时子0.9%氯化钠溶液0.3mL连续灌胃,1次/d,共9d(d1~9).给药结束后24h分离小鼠骨髓HSC,以衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associated beta-galactosidase,SA-β-gal)染色检测HSC衰老情况,流式细胞术检测细胞周期,CCK-8检测细胞活力.Western blot检测p16Ink4a-Rb信号通路p16、CDK4/6、pRb蛋白的表达水平,qPCR检测p16、CDK4/6、pRb的mRNA表达水平.[结果]与对照组比较,模型组HSC的细胞活力明显降低(P<0.01),SA-β-gal染色阳性率明显升高(P<0.01),S期细胞比例明显升高(P<0.01),p16蛋白的表达水平明显升高(P<0.01),CDK4/6、pRb蛋白的表达水平明显降低(P<0.01);与模型组比较,龟鹿二仙胶组HSC的细胞活力明

作者:王珏;陈朝辉;邵科钉;张卫平;应吟吟;林胜友

来源:浙江中医药大学学报 2018 年 42卷 6期

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作者:
王珏;陈朝辉;邵科钉;张卫平;应吟吟;林胜友
来源:
浙江中医药大学学报 2018 年 42卷 6期
标签:
化疗 肿瘤 骨髓抑制 造血干细胞衰老 龟鹿二仙胶 信号通路 p16Ink4a-Rb
[目的]探讨龟鹿二仙胶对化疗诱导的骨髓造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)衰老的影响及其相关机制.[方法]30只雄性昆明小鼠右腋部皮下注射肝癌细胞株H22细胞悬液0.1mL,细胞浓度为1.0×107个/mL,建立荷瘤小鼠模型.将荷瘤小鼠随机分为3组(对照组、模型组、龟鹿二仙胶组),对照组小鼠腹腔注射0.9%氯化钠溶液0.2mL,1次/d,连续3d(d1~3);其余两组小鼠均腹腔注射环磷酰胺100mg/(kg·d),1次/d,连续3d(d1~3).龟鹿二仙胶组小鼠同时给予龟鹿二仙胶9.5g/(kg·d)灌胃,1次/d,共9d(d1~9);对照组和模型组同时子0.9%氯化钠溶液0.3mL连续灌胃,1次/d,共9d(d1~9).给药结束后24h分离小鼠骨髓HSC,以衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associated beta-galactosidase,SA-β-gal)染色检测HSC衰老情况,流式细胞术检测细胞周期,CCK-8检测细胞活力.Western blot检测p16Ink4a-Rb信号通路p16、CDK4/6、pRb蛋白的表达水平,qPCR检测p16、CDK4/6、pRb的mRNA表达水平.[结果]与对照组比较,模型组HSC的细胞活力明显降低(P<0.01),SA-β-gal染色阳性率明显升高(P<0.01),S期细胞比例明显升高(P<0.01),p16蛋白的表达水平明显升高(P<0.01),CDK4/6、pRb蛋白的表达水平明显降低(P<0.01);与模型组比较,龟鹿二仙胶组HSC的细胞活力明