目的建立可受四环素诱导调控的高表达外源基因的真核表达体系Hep3BTet-On细胞株,用于基因功能的研究.方法 将pTet-On质粒用脂质体介导法转染Hep3B细胞,经G418筛选后的克隆用有限稀释法进行单克隆化.单克隆分别扩增后,瞬时转染pTRE-luc(编码荧光素酶蛋白)质粒,Dox诱导表达后,检测荧光素酶活性,逐一筛选四环素调控高表达外源基因的Hep3B Tet-On细胞株.结果成功构建了一株受Dox调控的高表达低背景的Hep3B Tet-On细胞株.结论 Hep3B Tet On细胞株可用于外源基因的真核调控高表达,为研究真核基因功能提供了一种有力的实验手段.
作者:王俊茹;覃文新;舒惠群;潘勇;张玉燕;万大方
来源:肿瘤 2002 年 22卷 3期