目的:研究肺癌A549细胞条件培养液(conditioned medium, CM)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)生存活性和凋亡的影响,以及PI3K-Akt信号通路在其中的作用.方法:用制备获得的人肺癌A549细胞CM 培养HUVECs;XTT 法检测HUVECs活性; Hoechst 33258染色,荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学改变;FCM法检测细胞的凋亡率; Western印迹法检测Akt总蛋白和磷酸化Akt蛋白表达.分别用特异性PI3K抑制剂 wortmannin(WT)和针对Akt1基因的siRNA (siAkt1)转染HUVECs, RT-PCR法检测Akt亚型mRNA的表达,并观察上述各指标的变化.结果:在CM刺激后24 h, HUVECs活性明显增强(P=0.037),凋亡率下降(P =0.001).CM呈时间依赖性激活HUVECs Akt磷酸化,CM处理后15 min即显示磷酸化Akt水平增高,30 min达高峰,此后呈下降趋势.WT或siAkt1转染均能阻断前述效应.结论:肺癌A549细胞CM经PI3K-Akt途径促进HUVECs存活并抑制其凋亡,其中Akt1起关键作用.
作者：涂明利；熊畅；刘先军；罗国仕；杜春玲；徐永健
来源：肿瘤 2010 年 30卷 2期
