目的 探讨Ki67基因小干扰RNA(Ki67-siRNA)增殖型腺病毒对肺癌细胞的杀伤作用及Ki67的表达情况.方法 提取重组腺病毒的DNA,PCR鉴定正确后,大量扩增,氯化铯梯度离心纯化,测病毒滴度.ZD-Ki67感染人肺癌细胞系(A549),通过荧光显微镜下观察和结晶紫染色法检测细胞病作用、MTT法检测细胞存活、Western印迹法检测E1A、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Ki67表达.结果 PCR鉴定表明ZD55-Ki67包含目的基因且无野生型腺病毒的污染;ZD55-Ki67滴度为4.5×1010 PFU/ml;免疫印迹法证实ZD55-Ki67在肿瘤细胞中表达E1A;ZD55-Ki67抑制Ki67表达及肺癌细胞生长的作用显著优于Ad-Ki67.结论 ZD55-Ki67能够有效抑制Ki67基因的表达,降低肺癌细胞的增殖能力,为肺癌研究和抗肿瘤基因治疗提供新的策略.
作者：毛立军；郑骏年；郑宏祥；孙晓青；陈家存
来源：肿瘤防治研究 2007 年 34卷 4期
