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目的 构建pcDNA3.1-Rap2b真核表达载体,以外源基因Rap2b转染NIH3T3细胞,以了解该基因对NIH3T3细胞AKT、ERK、JNK和P38信号转导通路的影响,为探讨该基因在人肺癌发生中的作用提供实验依据.方法 构建人Rap2b真核表达载体pcDNA3.1-Rap2b并稳定转染NIH3T3细胞,利用Western blot方法 对转染的细胞进行AKT、ERK、JNK和P38磷酸化蛋白及总蛋白表达水平检测.结果 转染pcDNA3.1-Rap2b质粒的细胞与转染空质粒pcDNA3.1的细胞相比,其AKT、ERK、JNK磷酸化蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05),而P38磷酸化蛋白表达水平明显上调(P<0.05).结论 Rap2b基因外源性高表达可能对P38通路有活化作用,对JNK、ERK、AKT通路无活化作用.

作者:张巧;邢瑞婷;徐红辉;袁劲松;李春阳;吴卫东;吴逸明;程书钧

来源:肿瘤防治研究 2010 年 37卷 6期

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作者:
张巧;邢瑞婷;徐红辉;袁劲松;李春阳;吴卫东;吴逸明;程书钧
来源:
肿瘤防治研究 2010 年 37卷 6期
标签:
Rap2b基因 NIH3T3细胞 真核表达载体 信号转导通路
目的 构建pcDNA3.1-Rap2b真核表达载体,以外源基因Rap2b转染NIH3T3细胞,以了解该基因对NIH3T3细胞AKT、ERK、JNK和P38信号转导通路的影响,为探讨该基因在人肺癌发生中的作用提供实验依据.方法 构建人Rap2b真核表达载体pcDNA3.1-Rap2b并稳定转染NIH3T3细胞,利用Western blot方法 对转染的细胞进行AKT、ERK、JNK和P38磷酸化蛋白及总蛋白表达水平检测.结果 转染pcDNA3.1-Rap2b质粒的细胞与转染空质粒pcDNA3.1的细胞相比,其AKT、ERK、JNK磷酸化蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05),而P38磷酸化蛋白表达水平明显上调(P<0.05).结论 Rap2b基因外源性高表达可能对P38通路有活化作用,对JNK、ERK、AKT通路无活化作用.