目的 观察两种端粒相关的反义寡核苷酸对人肺腺癌细胞A549形态、功能、凋亡及细胞传代的影响.方法 将培养的A549细胞随机分为空白对照组、端锚酶正义寡核苷酸对照组(sTANKS)、端粒酶催化亚单位正义寡核苷酸对照组(shTERT)、端锚酶反义寡核苷酸实验组(asTANKS)、端粒酶催化亚单位反义寡核苷酸实验组(ashTERT)、端锚酶及端粒酶催化亚单位反义寡核苷酸联合实验组(as-TANKS+ashTERT),分别与不同的正、反义寡核苷酸作用,光学显微镜下观察细胞形态,细胞氚摄取率([3H]-TdR)监测细胞利用合成DNA的胸腺嘧啶的能力,β-半乳糖苷酶(X-Gal)转染效率评估细胞衰老状态下的应激能量代谢,hoechst33342荧光染色检测A549细胞凋亡,通过传代实验分析细胞寿命.结果 联合作用的两种反义寡核苷酸(ashTERT+ asTANKS)能明显诱导A549细胞的衰老及凋亡,抑制DNA合成的含氚的胸腺嘧啶的摄取,增加细胞衰老状态的β-半乳糖苷酶(X-Gal)转染效率;并使A549细胞平均寿命明显缩短,在经过(24.53±0.40)次倍增后发生传代终止,与单独作用的asTANKS或ashTERT相比均有明显的差异.结论 两种针对端粒的反义寡核苷酸的联合作用,使A549细胞从形态及功能上倾向于衰老、“去永生化”,有可能成为新的抗肿瘤药物靶点.
作者:卢宏达;孔庆志;雷章;陈卫群;王纯;鲁明骞;黄婷
来源:肿瘤防治研究 2013 年 40卷 5期