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目的 探讨Foxp1对肝癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响.方法 体外合成干扰Foxp1功能的小核酸片段(siRNA Foxp1),通过重组技术将其插入到慢病毒三质粒系统的转移质粒中,利用包装细胞(293T)将三质粒系统组装为完整的反转录慢病毒载体(lenti-pLL3.7-Foxp1-siRNA),感染高表达Foxp1的肝癌细胞株.同时构建不合有Foxp1-siRNA序列的直接三质粒系统包装的空病毒载体对照组.荧光显微镜观察慢病毒载体介导siRNA感染细胞的效果.Westem blot和Real-time QPCR(RT-QPCR)分别检测肝癌细胞中Foxp1蛋白表达和mRNA水平.CCK-8实验、流式细胞仪、细胞划痕愈合实验和侵袭小室实验分别检测细胞增殖、凋亡和迁移的改变.结果 与对照组细胞比较,肝癌细胞感染lenti-pLL3.7-Foxp 1-siRNA后,细胞中Foxp1蛋白和mRNA表达显著下降,增殖活性受到显著抑制,细胞凋亡明显增加,在二维空间和三维空间的迁移细胞显著减少(均P<0.01).结论 Foxp1作为一种多功能转录因子,促进肝癌细胞的增殖和迁移,抑制其凋亡.

作者:秦婧;王桂兰;徐玉音;陈莉

来源:肿瘤防治研究 2014 年 41卷 4期

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作者:
秦婧;王桂兰;徐玉音;陈莉
来源:
肿瘤防治研究 2014 年 41卷 4期
标签:
慢病毒 Foxp1 siRNA 肝癌细胞 增殖 凋亡 迁移 Lentiviral Foxp1 siRNA Hepatoma carcinoma cell(7721 cell) Proliferation Apoptosis Migration
目的 探讨Foxp1对肝癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响.方法 体外合成干扰Foxp1功能的小核酸片段(siRNA Foxp1),通过重组技术将其插入到慢病毒三质粒系统的转移质粒中,利用包装细胞(293T)将三质粒系统组装为完整的反转录慢病毒载体(lenti-pLL3.7-Foxp1-siRNA),感染高表达Foxp1的肝癌细胞株.同时构建不合有Foxp1-siRNA序列的直接三质粒系统包装的空病毒载体对照组.荧光显微镜观察慢病毒载体介导siRNA感染细胞的效果.Westem blot和Real-time QPCR(RT-QPCR)分别检测肝癌细胞中Foxp1蛋白表达和mRNA水平.CCK-8实验、流式细胞仪、细胞划痕愈合实验和侵袭小室实验分别检测细胞增殖、凋亡和迁移的改变.结果 与对照组细胞比较,肝癌细胞感染lenti-pLL3.7-Foxp 1-siRNA后,细胞中Foxp1蛋白和mRNA表达显著下降,增殖活性受到显著抑制,细胞凋亡明显增加,在二维空间和三维空间的迁移细胞显著减少(均P<0.01).结论 Foxp1作为一种多功能转录因子,促进肝癌细胞的增殖和迁移,抑制其凋亡.