[目的]利用RNA干扰(RNAi)技术观测其对白血病K562细胞cyclin D1基因的沉默效应及对细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响.[方法]体外构建靶向cyclin D1基因的小发夹RNA(shRNA)表达质粒,通过壳聚糖介导转染K562细胞,Western blot分析检测转染前后cvclin D1蛋白表达变化;集落形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡情况.[结果]构建靶向cyclin D1基因的shRNA表达质粒(pshRNA-419和pshRNA-575)经壳聚糖转染后,能显著抑制cyclin D1基因表达;抑制K562细胞增殖,影响其集落形成能力;细胞阻滞于G0/G1期,细胞凋亡明显.而m-pshRNA-790质粒并无上述生物学效应.[结论]cyclin D1基因表达下调可抑制K562细胞生长,影响细胞周期分布,并诱导细胞凋亡.提示cyclin D1基因可能是白血病治疗的一个有效靶点.
作者：万一元；刘扬清；陈小飞；姜文奇
来源：肿瘤学杂志 2008 年 14卷 1期
