[目的]鉴定放射抗拒性食管癌细胞株KYSE-150R获得上皮—间质转化(EMT)表型.[方法]食管鳞状细胞癌细胞株KYSE-150经分次反复照射、单克隆培养,筛选出具有放射抗拒性细胞株KYSE-150R.克隆形成实验计算细胞存活率,拟合生存曲线并计算放射生物学参数.高倍显微镜下观察细胞形态学变化.采用RT-PCR、Western Blot和免疫荧光检测上皮表型标志物E钙黏蛋白(E-cad)、间质表型标志物波形蛋白(VIM)和转录因子Slug、Snail与Twist的表达.[结果]构建的食管癌细胞株KYSE-150R比其亲本对射线更加抗拒,经传代50代后仍保留放射抗拒性.放射抗拒的食管癌细胞株KYSE-150R发生EMT相符的形态学改变:细胞呈纺锤体状,极性消失.与母株相比,KYSE-150R中E-cad表达下降,VIM、Slug及Snail表达上调,Twist表达未见明显变化.免疫荧光染色证实细胞膜E-cad蛋白的丢失,上调的β-catenin移位至细胞核.[结论]放射抗拒的食管癌细胞株KYSE-150R获得了EMT表型,其与食管癌放射抗拒的形成有关.
作者:谢聪颖;苏华芳;景钊;张力;薛圣留;邓霞;吴式琇;伍钢
来源:肿瘤学杂志 2012 年 18卷 7期