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[目的]研究自噬相关基因ATG7对神经母细胞瘤增殖和化疗耐药性的影响, 初步探索其分子机制, 为神经母细胞瘤临床治疗提供新的线索和理论依据.[方法]在神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y和SK-N-BE2中, 慢病毒转染敲减ATG7基因, 采用MTT染色检测ATG7对细胞增殖能力的影响, 同时通过Western blotting方法检测细胞内自噬标志性蛋白LC3表达量来反映细胞内自噬水平;通过检测Bcl-2、Bax、Caspase-3等凋亡相关蛋白研究ATG7对细胞凋亡的影响.SH-SY5Y细胞经阿霉素处理后, 采用实时无标记细胞分析仪连续监测细胞增殖情况, 探讨ATG7在神经母细胞瘤耐药中作用.[结果]敲减ATG7基因能显著抑制细胞内自噬水平, 而且ATG7敲减后细胞在第4、5d的增殖倍数分别为3.05±0.05和3.92±0.08, 低于对照组的3.40±0.05和4.35±0.13 (P=0.0012, P=0.0085);与对照组相比, ATG7敲减组其凋亡抑制蛋白Bcl-2表达明显降低, 促凋亡蛋白Bax和Caspase-3表达显著升高 (P<0.05) .经阿霉素处理后, ATG7敲减组细胞增殖率明显低于对照组 (P<0.05) .[结论]由于ATG7基因介导细胞自噬过程, ATG7基因在神经母细胞瘤中可能通过自噬作用促进肿瘤细胞异常增殖, 抑制细胞凋亡, 进而增强细胞耐药性.

作者:石金;于永波;张杰;鲁洁;邰隽;金雅琼;杨业然;李宏彬;陈峰;初平;贾超;李艳珍;郭永丽;倪鑫

来源:肿瘤学杂志 2018 年 24卷 6期

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作者:
石金;于永波;张杰;鲁洁;邰隽;金雅琼;杨业然;李宏彬;陈峰;初平;贾超;李艳珍;郭永丽;倪鑫
来源:
肿瘤学杂志 2018 年 24卷 6期
标签:
ATG7基因 神经母细胞瘤 自噬 细胞增殖 耐药性 ATG7 gene autophagy neuroblastoma cell proliferation drug resistance
[目的]研究自噬相关基因ATG7对神经母细胞瘤增殖和化疗耐药性的影响, 初步探索其分子机制, 为神经母细胞瘤临床治疗提供新的线索和理论依据.[方法]在神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y和SK-N-BE2中, 慢病毒转染敲减ATG7基因, 采用MTT染色检测ATG7对细胞增殖能力的影响, 同时通过Western blotting方法检测细胞内自噬标志性蛋白LC3表达量来反映细胞内自噬水平;通过检测Bcl-2、Bax、Caspase-3等凋亡相关蛋白研究ATG7对细胞凋亡的影响.SH-SY5Y细胞经阿霉素处理后, 采用实时无标记细胞分析仪连续监测细胞增殖情况, 探讨ATG7在神经母细胞瘤耐药中作用.[结果]敲减ATG7基因能显著抑制细胞内自噬水平, 而且ATG7敲减后细胞在第4、5d的增殖倍数分别为3.05±0.05和3.92±0.08, 低于对照组的3.40±0.05和4.35±0.13 (P=0.0012, P=0.0085);与对照组相比, ATG7敲减组其凋亡抑制蛋白Bcl-2表达明显降低, 促凋亡蛋白Bax和Caspase-3表达显著升高 (P<0.05) .经阿霉素处理后, ATG7敲减组细胞增殖率明显低于对照组 (P<0.05) .[结论]由于ATG7基因介导细胞自噬过程, ATG7基因在神经母细胞瘤中可能通过自噬作用促进肿瘤细胞异常增殖, 抑制细胞凋亡, 进而增强细胞耐药性.