目的 建立荧光定量聚合酶链反应RT-PCR检测癌组织β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulin Ⅲ)表达的方法.方法 提取组织标本的总RNA,反转录合成cDNA,PCR扩增产物连接到T载体,筛选重组体,将重组体再培养纯化,制备β-tubulin Ⅲ和看家基因β-actin的标准品,测序验证读码框的正确性.结果 以Ct值为纵坐标,5～7个不同浓度的β-tubulin Ⅲ和β-actin标准品的浓度对数值为横坐标制作标准曲线,线性相关系数均为0.99.结论 构建的两个基因β-tubulin Ⅲ和β-actin的标准品可以得到良好的标准曲线,且标准曲线显示好的线性关系.该法特异性好,灵敏度高,重复性好,可作为临床标准化的检测方法.
作者：陈志红；谢至；郭爱林；张绪超；陈世良；林嘉颖；董嵩；吴一龙
来源：肿瘤研究与临床 2007 年 19卷 7期
