目的 观察p53上调凋亡调控因子(PUMA)对不同p53表型人类脑胶质瘤细胞系生长的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 构建PUMA腺病毒(Ad-PUMA)及空载体腺病毒(Ad-DsRed),分别转染胶质瘤细胞系U251(p53突变型)及SHG-44(p53野生型),CCK-8法检测各组细胞增殖能力；流式细胞术检测各组细胞凋亡率；Western blot法检测PUMA及凋亡相关蛋白bcl-2、Bax的表达；Caspase 活性检测试剂盒检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性.结果 在p53状态不同的胶质瘤细胞系U251及SHG-44中,Ad-PUMA转染组与空载体组及空白对照组比较,均显现出细胞增殖抑制效应[抑制率分别为(50.89±4.73)％和(44.45±5.33)％,P＜ 0.05]以及促凋亡作用[凋亡率分别为(44.89±5.08)％和(31.67±7.32)％,P＜0.05]；Western blot结果显示,Ad-PUMA组胶质瘤细胞转染后,可见PUMA蛋白表达升高,同时伴随抗凋亡蛋白bcl-2表达降低及促凋亡蛋白Bax表达增强(P＜0.05)；Caspase活性检测结果显示Ad-PUMA组Caspase-3、Caspase-9活性增加(P＜0.05),而Caspase-8活性未见明显改变(P＞ 0.05).结论 无论p53表型如何,PUMA均可抑制胶质瘤细胞增殖,促进其凋亡,其机制可能是通过线粒体凋亡途径即上调Bax,抑制bcl-2表达,进而激活Caspase-9实现的,Ad-PUMA有望成为胶质瘤基因

作者：王新星；苗旺；王宏勤；刘晓东；范益民

来源：肿瘤研究与临床 2013 年 25卷 6期