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目的:双链RNA特异性地干扰相应序列的mRNA的功能,是介导转录后基因沉默的重要因素.本研究旨在探讨能靶向作用于人端粒酶催化亚单位(humar telomerase reverse transcriptase,hTERT)mRNA的小发夹双链RNA是否能抑制人宫颈癌细胞(Hela)中hTERT蛋白的表达.方法:构建能特异性作用于hTERT mRNA的小发夹RNA质粒表达载体.用免疫荧光法检测转染入Hela细胞的上述质粒对hTERT蛋白表达的影响.结果:转染特异性小发夹双链RNA质粒表达载体(p U6-TERT和pH1-TERT)的Hela细胞中其表达hTERT蛋白的阳性细胞数量明显减少;而转染非相关性小发夹双链RNA质粒表达载体p U6-bc12的Hela细胞并不影响其hTERT蛋白的表达.结论:该研究构建的靶向作用于hTERT的小发夹双链RNA质粒载体能使Hela细胞中hTERT mRNA的表达水平下调,并且这种下调作用能保持较长的时间.

作者:郭丹;傅更锋;樊燕蓉;刘新卷;徐根兴;王建军

来源:中日友好医院学报 2004 年 18卷 5期

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作者:
郭丹;傅更锋;樊燕蓉;刘新卷;徐根兴;王建军
来源:
中日友好医院学报 2004 年 18卷 5期
标签:
人端粒酶催化亚单位 RNA干扰 小双链RNA 小发夹RNA Hela细胞
目的:双链RNA特异性地干扰相应序列的mRNA的功能,是介导转录后基因沉默的重要因素.本研究旨在探讨能靶向作用于人端粒酶催化亚单位(humar telomerase reverse transcriptase,hTERT)mRNA的小发夹双链RNA是否能抑制人宫颈癌细胞(Hela)中hTERT蛋白的表达.方法:构建能特异性作用于hTERT mRNA的小发夹RNA质粒表达载体.用免疫荧光法检测转染入Hela细胞的上述质粒对hTERT蛋白表达的影响.结果:转染特异性小发夹双链RNA质粒表达载体(p U6-TERT和pH1-TERT)的Hela细胞中其表达hTERT蛋白的阳性细胞数量明显减少;而转染非相关性小发夹双链RNA质粒表达载体p U6-bc12的Hela细胞并不影响其hTERT蛋白的表达.结论:该研究构建的靶向作用于hTERT的小发夹双链RNA质粒载体能使Hela细胞中hTERT mRNA的表达水平下调,并且这种下调作用能保持较长的时间.