[目的]探讨胎鼠肺泡Ⅱ型细胞原代培养及鉴定方法,建立肺泡Ⅱ型细胞培养模型,为体外研究肺泡Ⅱ型细胞及胎儿肺发育提供实验手段.[方法]采用低浓度胰酶消化20 d胎鼠肺组织,经差速离心和特异性免疫吸附后,分离、纯化胎鼠肺泡Ⅱ型细胞,进行原代培养;根据细胞生长特点、形态特征、细胞表型和肺表面活性特异蛋白A的分泌,用免疫细胞化学染色、透射电镜及酶联免疫吸附法对分离的细胞进行形态学和功能鉴定.[结果]原代培养的肺Ⅱ型细胞12 h开始贴壁,外观呈多边形,岛状生长.培养的24～48 h,细胞连接成单层,胞浆内颗粒明显,培养的6～7 d细胞内颗粒大量减少;免疫细胞化学鉴定细胞肺表面活性特异蛋白A(surfactant protein A,SP-A)染色阳性,透射电镜可见观察到细胞内板层小体,培养液中SP-A含量随培养时间延长逐渐增多,于培养36 h达峰值,为80 ng/mL;细胞纯度达(92±2)
作者：陈慧；王振花；张建平；杨冬梓
来源：中山大学学报（医学科学版） 2006 年 27卷 5期
