[目的]建立一种可临床应用的并能稳定表达水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4,用于检测视神经脊髓炎患者血清中的AQP4抗体.[方法]构建有AQP4基因的表达载体,利用脂质体将载体转入HEK293细胞,G418筛选,RT-PCR、间接免疫荧光检测稳定细胞系中水通道蛋白4的表达及分布.细胞间接免疫荧光检测20例NMO患者、20例MS患者、30例健康对照血清中的AQP4抗体,并同鼠脑间接免疫荧光检测法比较.[结果]限制性酶切消化、PCR、测序结果证明载体构建成功.间接免疫荧光证实稳定细胞系中有AQP4表达.且主要分布在细胞膜上.20例NMO患者血清中11例NMO-IgG阳性,18例AQP4抗体阳性,滴度在1:60-1:15 360之间,而MS患者仅检测到1例阳性,健康对照未检测到阳性.[结论]成功构建稳定表达水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4,并检测出国人NMO患者血清中存在AQP4抗体,且敏感性高于鼠脑法,可以有效的鉴别视神经脊髓炎和多发性硬化.
作者：刘俊秀；孙巧松；丰岩清；曾缨；赖蓉；陈曦；黄帆
来源：中山大学学报（医学科学版） 2010 年 31卷 6期
