[目的]采用多重置换扩增建立一种可靠、准确的植入前遗传学诊断方法,可应用于软骨发育不全的植入前遗传学诊断.[方法]对软骨发育不全高危家系采用8个与成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)基因紧密连锁的短串联重复序列(STR)进行软骨发育与不全(ACH)的单体型分析.采用多重置换扩增(MDA)对单细胞进行全基因组扩增,对其产物采用在家系分析中具有多态性的STR位点及PCR-限制性酶切法检测FGFR3基因进行分析.[结果]对家系分析中,共有5个STR位点具有多态性.共进行了10个单淋巴细胞及11个单卵裂球的MDA,MDA扩增效率为100％(21/21),单个淋巴细胞MDA产物的PCR结果与其外周血结果比较,平均PCR扩增率为96.8％(122/126,变化范围95.4％～100％),平均ADO率为8.5％(7/82,变化范围0～12.6％),综合诊断效率为100％,其中一个单淋巴细胞的MDA产物在经过酶切后未能检测出两个条带,出现了异常等位基因的脱扣,在11个单卵裂球的MDA产物中进行致病基因的检测,经酶切后均只产生一条条带.[结论]本研究采用限制性酶切法直接检测FGFR3基因及单体型分析在单细胞水平对ACH进行检测,两者相结合可避免污染、等位基因脱扣等导致的误诊,可提高软骨发育不全的PGD诊断效率,为进一步的临床应用奠定了基础.
作者：沈晓婷；郭奕斌；徐艳文；钟依平；曾艳红；王静；丁晨晖；周灿权
来源：中山大学学报（医学科学版） 2015 年 36卷 4期
