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[目的]旨在通过体内研究,探讨内质网应激的主要标志物,活化转录因子4(ATF4)在小梁网功能障碍、细胞凋亡中所起的作用,以期为阐明原发性开角青光眼(POAG)的发病机制提供新的思路.[方法]选取6~8周大的C57BL/6J小鼠47只,实验组(24只,24眼)单眼前房注射ATF4腺病毒,对照组(23只,23眼)单眼前房注射GFP腺病毒.在注射后的不同时间点,分别取实验组和对照组小鼠的前房角组织,用冰冻切片和免疫荧光染色法观察病毒荧光及内质网应激相关蛋白ATF4和C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达;用实时荧光定量PCR法检测炎症因子IL-1α,IL-1β,IL-6以及内皮细胞白细胞黏附分子1(ELAM-1)在mRNA水平的表达;用TUNEL染色法观察小梁网细胞的凋亡情况;用超薄切片和透射电镜观察小梁网细胞的超微结构.在注射前及注射后第3、7、10及13天分别用回弹式眼压计测量小鼠的日间及夜间眼压.[结果]注射后24 h即可观察到注射眼小梁网内的病毒荧光,且实验组小梁网ATF4的表达明显上调.在注射后3天,实验组小梁网组织的炎症因子在mRNA水平的表达较对照组明显升高.注射后7天,实验组小梁网组织出现CHOP的表达上调;小梁网TUNEL阳性细胞数比对照组显著增加;实验组小梁网细胞内可见明显扩张的粗面内质网.在注射后第7、10及13天,实验组日间眼压及夜间眼压均高于对照

作者:薛然;李晶明;陈果;钟毅敏

来源:中山大学学报(医学科学版) 2018 年 39卷 4期

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薛然;李晶明;陈果;钟毅敏
来源:
中山大学学报(医学科学版) 2018 年 39卷 4期
标签:
活化转录因子4 炎症 细胞凋亡 小梁网
[目的]旨在通过体内研究,探讨内质网应激的主要标志物,活化转录因子4(ATF4)在小梁网功能障碍、细胞凋亡中所起的作用,以期为阐明原发性开角青光眼(POAG)的发病机制提供新的思路.[方法]选取6~8周大的C57BL/6J小鼠47只,实验组(24只,24眼)单眼前房注射ATF4腺病毒,对照组(23只,23眼)单眼前房注射GFP腺病毒.在注射后的不同时间点,分别取实验组和对照组小鼠的前房角组织,用冰冻切片和免疫荧光染色法观察病毒荧光及内质网应激相关蛋白ATF4和C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达;用实时荧光定量PCR法检测炎症因子IL-1α,IL-1β,IL-6以及内皮细胞白细胞黏附分子1(ELAM-1)在mRNA水平的表达;用TUNEL染色法观察小梁网细胞的凋亡情况;用超薄切片和透射电镜观察小梁网细胞的超微结构.在注射前及注射后第3、7、10及13天分别用回弹式眼压计测量小鼠的日间及夜间眼压.[结果]注射后24 h即可观察到注射眼小梁网内的病毒荧光,且实验组小梁网ATF4的表达明显上调.在注射后3天,实验组小梁网组织的炎症因子在mRNA水平的表达较对照组明显升高.注射后7天,实验组小梁网组织出现CHOP的表达上调;小梁网TUNEL阳性细胞数比对照组显著增加;实验组小梁网细胞内可见明显扩张的粗面内质网.在注射后第7、10及13天,实验组日间眼压及夜间眼压均高于对照