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[目的]探讨长链非编码RNA-1708 (lncRNA-1708)在人骨髓间充质干细胞(hBMSC)成骨分化中的表达差异及其对hBMSC成骨分化的影响.[方法]将购买的3组不同来源的hBMSC进行体外增殖培养,并用实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应(qRT-PCR)方法检测3组hBMSC成骨诱导分化前后lncRNA-1708的表达,分析其与hBMSC成骨分化的关系.分别转染lncRNA-1708过表达慢病毒及lncRNA-1708干扰质粒,获得稳定的hBMSC细胞株后成骨诱导分化14 d,用qRT-PCR检测Runt相关转录因子2(RUNX2)、碱性磷酸酶(ALP) mRNA的表达并行碱性磷酸酶染色.[结果]相较成骨诱导分化前,3组hBMSC成骨诱导分化7d后lncRNA-1708表达量均降低(P< 0.001).在稳定高表达lncRNA-1708和低表达lncRNA-1708的hBMSC细胞株中lncRNA-1708的表达量较其对应的阴性对照相比有明显变化(lncRNA-1708过表达细胞株:48 h,P<0.05;lncRNA-1708低表达细胞株:48 h,P<0.01).与阴性对照组相比,转染过表达lncRNA-1708的hBMSC中成骨相关基因RUNX2、ALP表达水平降低(0.46±0.03 vs.1.00±0.02,0.15±0.07 vs.1.02±0.28,P均<0.01).相反,沉默LncRNA-1708的hBMSC中的RUNX2、ALP表达水平与其对应的阴性对照组相比则升高了(1.62±0.18 vs.1.00±0.04,1.58±0.11 vs.1.01±0.18,P均<0.01).[结论]L

作者:曹峻川;孙翔;赵建江

来源:中山大学学报(医学科学版) 2019 年 40卷 3期

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作者:
曹峻川;孙翔;赵建江
来源:
中山大学学报(医学科学版) 2019 年 40卷 3期
标签:
人骨髓间充质干细胞 成骨分化 长链非编码RNA-1708 抑制效应
[目的]探讨长链非编码RNA-1708 (lncRNA-1708)在人骨髓间充质干细胞(hBMSC)成骨分化中的表达差异及其对hBMSC成骨分化的影响.[方法]将购买的3组不同来源的hBMSC进行体外增殖培养,并用实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应(qRT-PCR)方法检测3组hBMSC成骨诱导分化前后lncRNA-1708的表达,分析其与hBMSC成骨分化的关系.分别转染lncRNA-1708过表达慢病毒及lncRNA-1708干扰质粒,获得稳定的hBMSC细胞株后成骨诱导分化14 d,用qRT-PCR检测Runt相关转录因子2(RUNX2)、碱性磷酸酶(ALP) mRNA的表达并行碱性磷酸酶染色.[结果]相较成骨诱导分化前,3组hBMSC成骨诱导分化7d后lncRNA-1708表达量均降低(P< 0.001).在稳定高表达lncRNA-1708和低表达lncRNA-1708的hBMSC细胞株中lncRNA-1708的表达量较其对应的阴性对照相比有明显变化(lncRNA-1708过表达细胞株:48 h,P<0.05;lncRNA-1708低表达细胞株:48 h,P<0.01).与阴性对照组相比,转染过表达lncRNA-1708的hBMSC中成骨相关基因RUNX2、ALP表达水平降低(0.46±0.03 vs.1.00±0.02,0.15±0.07 vs.1.02±0.28,P均<0.01).相反,沉默LncRNA-1708的hBMSC中的RUNX2、ALP表达水平与其对应的阴性对照组相比则升高了(1.62±0.18 vs.1.00±0.04,1.58±0.11 vs.1.01±0.18,P均<0.01).[结论]L