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目的:探讨基因1型戊型肝炎病毒(HEV)开放读码框3(ORF3)对人外周血来源的树突状细胞(DC)成熟和活化功能的影响.方法:抽取健康志愿者的外周血分离单个核细胞,经体外培养、诱导为DC.然后分别用含有ORF3的慢病毒载体以及空载载体感染DC 48h,流式细胞仪检测ORF3组、空载组和空白组细胞表面CD80、CD83、CD86的表达,ELISA法检测DC上清中IFN-β、IL-4、IL-10和IL-12的分泌.之后再加入TNF-α进一步刺激DC成熟,流式细胞仪检测各组细胞CD80、CD83、CD86以及IFN-β、IL-4、IL-10、IL-12的表达.最后将DC与T淋巴细胞共培养,CCK8法检测T淋巴细胞增殖.结果:含有ORF3组的DC与空载组相比,加入TNF前后,其细胞表面CD8o、CD83、CD86以及细胞上清中IFN-β、IL-4、IL-10和IL-12的表达都明显较低(P<0.05).ORF3组与空载组相比其刺激T细胞增殖的能力也较弱(P<0.05).结论:基因1型HEV ORF3可以抑制人外周血来源DC的成熟,抑制其分泌IFN-β、IL-4、IL-10和IL-12等细胞因子,抑制DC对T淋巴细胞的增殖刺激作用,从而削弱机体对HEV的免疫反应,实现免疫逃逸,可能是导致戊型肝炎慢性化的原因之一.

作者:彭文举;田德英;吴亮

来源:中西医结合肝病杂志 2019 年 29卷 2期

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作者:
彭文举;田德英;吴亮
来源:
中西医结合肝病杂志 2019 年 29卷 2期
标签:
戊型肝炎病毒 开放读码框3 树突状细胞
目的:探讨基因1型戊型肝炎病毒(HEV)开放读码框3(ORF3)对人外周血来源的树突状细胞(DC)成熟和活化功能的影响.方法:抽取健康志愿者的外周血分离单个核细胞,经体外培养、诱导为DC.然后分别用含有ORF3的慢病毒载体以及空载载体感染DC 48h,流式细胞仪检测ORF3组、空载组和空白组细胞表面CD80、CD83、CD86的表达,ELISA法检测DC上清中IFN-β、IL-4、IL-10和IL-12的分泌.之后再加入TNF-α进一步刺激DC成熟,流式细胞仪检测各组细胞CD80、CD83、CD86以及IFN-β、IL-4、IL-10、IL-12的表达.最后将DC与T淋巴细胞共培养,CCK8法检测T淋巴细胞增殖.结果:含有ORF3组的DC与空载组相比,加入TNF前后,其细胞表面CD8o、CD83、CD86以及细胞上清中IFN-β、IL-4、IL-10和IL-12的表达都明显较低(P<0.05).ORF3组与空载组相比其刺激T细胞增殖的能力也较弱(P<0.05).结论:基因1型HEV ORF3可以抑制人外周血来源DC的成熟,抑制其分泌IFN-β、IL-4、IL-10和IL-12等细胞因子,抑制DC对T淋巴细胞的增殖刺激作用,从而削弱机体对HEV的免疫反应,实现免疫逃逸,可能是导致戊型肝炎慢性化的原因之一.