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目的 观察祛风生脉颗粒对大鼠缺血心肌微血管内皮细胞(CMECs)自噬及血管新生的影响.方法 制备祛风生脉颗粒高剂量(Q-G组)、中剂量(Q-Z组)、低剂量(Q-D组)大鼠含药血清,分别与大鼠缺血CMECs共孵育,同时制备空白血清,分别与大鼠缺血CMECs(MX组)和正常大鼠CMECs(ZC组)共孵育.电镜观察各组细胞自噬小体及超微结构变化,Western-blot分析微管蛋白轻链3(LC3)-Ⅱ/Ⅰ比值及P62蛋白表达;划痕法观察细胞迁移能力,倒置相差显微镜下计数管腔形成数.结果 与ZC组相比,MX组电镜下观察到自噬小体,但未见到自噬溶酶体,LC3-Ⅱ/Ⅰ比值及P62蛋白表达均升高(P<0.05),细胞迁移数和管腔形成数均较ZC组降低(P<0.05);与MX组相比,Q-D组和Q-Z组电镜下观察到自噬小体增多,同时观察到较多的自噬溶酶体,LC3-Ⅱ/Ⅰ比值升高,P62蛋白表达降低(P<0.05),细胞迁移数和管腔形成数均较MX组增多(P<0.05);与Q-D组和Q-Z组相比,Q-G组电镜下观察到自噬溶酶体数目进一步增多;与MX组相比,Q-G组LC3-Ⅱ/Ⅰ比值显著升高,P62蛋白表达明显降低(P<0.01),细胞迁移数和成管数较MX组均显著增多(P<0.01).结论 祛风生脉颗粒能改善缺血CMECs迁移和成管能力,从而促进缺血心肌血管新生,其作用与药物剂量呈正相关,机制可能与增强缺血CMECs自噬有关.

作者:马培泽;杨春;杨雯晴;姜月华;吕娟

来源:中西医结合心脑血管病杂志 2018 年 16卷 24期

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作者:
马培泽;杨春;杨雯晴;姜月华;吕娟
来源:
中西医结合心脑血管病杂志 2018 年 16卷 24期
标签:
缺血心肌 祛风生脉颗粒 自噬 微血管内皮细胞 血管新生 溶酶体
目的 观察祛风生脉颗粒对大鼠缺血心肌微血管内皮细胞(CMECs)自噬及血管新生的影响.方法 制备祛风生脉颗粒高剂量(Q-G组)、中剂量(Q-Z组)、低剂量(Q-D组)大鼠含药血清,分别与大鼠缺血CMECs共孵育,同时制备空白血清,分别与大鼠缺血CMECs(MX组)和正常大鼠CMECs(ZC组)共孵育.电镜观察各组细胞自噬小体及超微结构变化,Western-blot分析微管蛋白轻链3(LC3)-Ⅱ/Ⅰ比值及P62蛋白表达;划痕法观察细胞迁移能力,倒置相差显微镜下计数管腔形成数.结果 与ZC组相比,MX组电镜下观察到自噬小体,但未见到自噬溶酶体,LC3-Ⅱ/Ⅰ比值及P62蛋白表达均升高(P<0.05),细胞迁移数和管腔形成数均较ZC组降低(P<0.05);与MX组相比,Q-D组和Q-Z组电镜下观察到自噬小体增多,同时观察到较多的自噬溶酶体,LC3-Ⅱ/Ⅰ比值升高,P62蛋白表达降低(P<0.05),细胞迁移数和管腔形成数均较MX组增多(P<0.05);与Q-D组和Q-Z组相比,Q-G组电镜下观察到自噬溶酶体数目进一步增多;与MX组相比,Q-G组LC3-Ⅱ/Ⅰ比值显著升高,P62蛋白表达明显降低(P<0.01),细胞迁移数和成管数较MX组均显著增多(P<0.01).结论 祛风生脉颗粒能改善缺血CMECs迁移和成管能力,从而促进缺血心肌血管新生,其作用与药物剂量呈正相关,机制可能与增强缺血CMECs自噬有关.