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目的 探讨丹参多酚酸盐(SAL)对过氧化氢(H2 O2)所致H9c2心肌细胞氧化应激损伤的影响及过氧化物酶体增殖子活化受体(PPARγ)/核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/抗血红素加氧酶-1(HO-1)通路在其中的调控作用.方法 以100μmol/L的H2 O2干预对数生长期H9c2细胞4 h建立心肌细胞氧化损伤模型,设置H2 O2组、SAL 50 mg/L组、SAL 100 mg/L组、SAL 200 mg/L组;另取对数生长期H9c2细胞作为正常组.药物干预24 h后,四唑盐(MTT)法和Annexin V-FITC/PI双染法分别检测细胞增殖和凋亡率,2,7-双乙酸二氯荧光(DCFH-DA)探针检测细胞活性氧(ROS)含量,生化分析法检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)漏出量,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化法、钼酸铵法分别检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性,蛋白免疫印迹法(Western Blotting)检测PPARγ、Nrf2、HO-1、核转录因子-κB(NF-κB)、激活型半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved Caspase-3)蛋白表达.结果 与H2 O2组比较,SAL 50 mg/L组、SAL 100 mg/L组、SAL 200 mg/L组细胞增殖率升高且凋亡率降低,ROS含量和CK-MB、LDH漏出量降低,MDA含量降低且SOD、CAT活性升高,PPARγ、Nrf2、HO-1蛋白表达上调且NF-κB、Cleaved Caspase-3表达下调,差异均有统计学意义(P<0.05或P<

作者:李兵

来源:中西医结合心脑血管病杂志 2021 年 19卷 20期

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作者:
李兵
来源:
中西医结合心脑血管病杂志 2021 年 19卷 20期
标签:
心肌细胞;丹参多酚酸盐;过氧化氢;氧化应激损伤;过氧化物酶体增殖子活化受体;核转录因子E2相关因子2;抗血红素加氧酶-1;核转录因子-κB;实验研究
目的 探讨丹参多酚酸盐(SAL)对过氧化氢(H2 O2)所致H9c2心肌细胞氧化应激损伤的影响及过氧化物酶体增殖子活化受体(PPARγ)/核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/抗血红素加氧酶-1(HO-1)通路在其中的调控作用.方法 以100μmol/L的H2 O2干预对数生长期H9c2细胞4 h建立心肌细胞氧化损伤模型,设置H2 O2组、SAL 50 mg/L组、SAL 100 mg/L组、SAL 200 mg/L组;另取对数生长期H9c2细胞作为正常组.药物干预24 h后,四唑盐(MTT)法和Annexin V-FITC/PI双染法分别检测细胞增殖和凋亡率,2,7-双乙酸二氯荧光(DCFH-DA)探针检测细胞活性氧(ROS)含量,生化分析法检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)漏出量,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化法、钼酸铵法分别检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性,蛋白免疫印迹法(Western Blotting)检测PPARγ、Nrf2、HO-1、核转录因子-κB(NF-κB)、激活型半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved Caspase-3)蛋白表达.结果 与H2 O2组比较,SAL 50 mg/L组、SAL 100 mg/L组、SAL 200 mg/L组细胞增殖率升高且凋亡率降低,ROS含量和CK-MB、LDH漏出量降低,MDA含量降低且SOD、CAT活性升高,PPARγ、Nrf2、HO-1蛋白表达上调且NF-κB、Cleaved Caspase-3表达下调,差异均有统计学意义(P<0.05或P<