目的:研究3'-甲异靛玉红对不同种系小鼠胸腺、脾淋巴细胞增殖及生物功能影响的调节,探讨其免疫抑制作用的机制.方法:处死8 w大雄性BALB/c、C57BL/6以及F1代杂交鼠,取胸腺、脾组织制成单细胞悬液,以5、10、15、20、25 μmol/L甲异靛玉红处理各组细胞,MTT法测定各种系小鼠脾和胸腺淋巴细胞增殖;ELISA法测定培养上清IL-12活性;流式细胞仪检测细胞周期,细胞凋亡率及死亡率,细胞内ROS浓度;RT-PCR检测细胞Bcl-2和CDK2基因mRNA水平;荧光显微镜检测细胞Bcl-2、Bax和CDK2蛋白表达率.结果:MTT结果显示,当浓度为15、20、25μmol/L甲异靛玉红作用24 h便可明显抑制3种小鼠胸腺、脾淋巴细胞增殖(P<0.05),此效应呈量效、时效依赖性.ELISA结果显示各浓度的甲异靛玉红对各小鼠胸腺和脾细胞各时间点分泌IL-12的功能较对照组显著减低(P<0.05).RT-PCR显示15μmol/L甲异靛玉红的处理12 h后细胞Bcl-2和CDK2的mRNA水平较对照组显著降低.流式细胞仪检测细胞凋亡率及死亡率表明,与对照组比较,15 μmol/L甲异靛玉红处理3种不同种系小鼠胸腺细胞、脾细胞均有部分细胞凋亡的现象,细胞死亡率也有升高.15 μmol/L靛玉红处理24 h后,各组双氢二氯荧光黄(2',7'-dichlorofluorescein,DCF)阳性的细胞百分比显著高于对照组,3种不同种系小鼠胸
作者：王秀菊；尹松梅；马丽萍；聂大年；谢双锋；李益清
来源：中药材 2010 年 33卷 7期
