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目的:测定湘西蛇足石杉不同部位石杉碱甲含量,分析石杉碱甲分布与赖氨酸脱羧酶基因(LDC)表达的关系.方法:采用HPLC测定蛇足石杉根、茎、叶中石杉碱甲含量,HPLC条件:Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.08 mol/L醋酸铵(32:68,V/V),流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,检测波长为308nm.以肌动蛋白基因为内参物,通过半定量RT-PCR比较LDC在根、茎、叶中的表达量.结果:石杉碱甲在0.5~10.0 μg/mL线性关系良好,平均加样回收率为102%,RSD为0.32%;湘西蛇足石杉根、茎、叶中石杉碱甲含量分别为(118.35 ±0.77) μg/g、(411.09±2.47) μg/g、(562.15±2.86) μg/g;半定量RT-PCR分析表明LDC在根、茎、叶中表达量无明显差异.结论:湘西蛇足石杉不同部位石杉碱甲含量差异显著;推测赖氨酸脱羧酶不是石杉碱甲生物合成中的关键酶.

作者:杜次;李菁;田向荣;朱越;彭清忠

来源:中药材 2013 年 36卷 3期

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作者:
杜次;李菁;田向荣;朱越;彭清忠
来源:
中药材 2013 年 36卷 3期
标签:
蛇足石杉 石杉碱甲 赖氨酸脱羧酶基因(LDC) 高效液相色谱法 半定量RT-PCR
目的:测定湘西蛇足石杉不同部位石杉碱甲含量,分析石杉碱甲分布与赖氨酸脱羧酶基因(LDC)表达的关系.方法:采用HPLC测定蛇足石杉根、茎、叶中石杉碱甲含量,HPLC条件:Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.08 mol/L醋酸铵(32:68,V/V),流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,检测波长为308nm.以肌动蛋白基因为内参物,通过半定量RT-PCR比较LDC在根、茎、叶中的表达量.结果:石杉碱甲在0.5~10.0 μg/mL线性关系良好,平均加样回收率为102%,RSD为0.32%;湘西蛇足石杉根、茎、叶中石杉碱甲含量分别为(118.35 ±0.77) μg/g、(411.09±2.47) μg/g、(562.15±2.86) μg/g;半定量RT-PCR分析表明LDC在根、茎、叶中表达量无明显差异.结论:湘西蛇足石杉不同部位石杉碱甲含量差异显著;推测赖氨酸脱羧酶不是石杉碱甲生物合成中的关键酶.