目的:建立亳菊EDT1抗旱基因遗传转化体系,并初步评价其耐旱性.方法:以亳菊茎段外植体为受体材料,抗草甘膦除草剂为筛选基因,通过发根农杆菌介导法转入EDT1抗旱基因.通过农杆菌介导,对影响亳菊遗传转化效率的四个因素进行讨论:侵染时间、农杆菌菌液浓度、乙酰丁香酮浓度和共培养时间,以及草甘膦最佳筛选浓度的研究.结果:建立了农杆菌介导的亳菊高效遗传转化体系,菌液浓度(A600)为0.6 ~0.8,乙酰丁香酮浓度150 μmol/L,侵染时间25 min,共培养3d,除菌培养后,可得到15 d最大转化效率95.6%.草甘膦对亳菊组培苗致死率的研究表明其最佳筛选浓度为100 mg/L.通过聚合酶链式反应(PCR)检测,初步得到5株转基因植株.结论:在干旱胁迫下,叶片中抗氧化酶活性和MDA含量测定表明,转基因植株具有较高的耐旱性.
作者:胡同华;陈达伟;王钰;刘芳源
来源:中药材 2017 年 40卷 1期