目的 构建基质金属蛋白酶-12(MMP-12)基因小干扰RNA片段(siRNA)表达质粒,探讨MMP-12基因在矽肺纤维化发展过程中的功能.方法 利用RNA干扰技术,将构建的MMP-12-siRNA表达质粒转染大鼠肺成纤维细胞(FB),筛选出最佳干扰基因序列.实验分为3组:对照组(C),加未经SiO2粉尘刺激的肺泡巨噬细胞(AM)培养上清液;SiO2刺激组(S),加经SiO2粉尘刺激的AM培养上清液;转染组(T),首先将筛选出的含最佳干扰基因序列的质粒转染FB,基因沉默后,再加经SiO2粉尘刺激的AM培养上清液.运用免疫细胞化学法检测各组中Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白的表达情况.结果 经条件上清培养液刺激后,S组FB中各时段Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原表达均比C组增加,S组Ⅰ型胶原蛋白为0.360 8±0.006 9～0.694 3±0.007 3,C组为Q.240 9±0.005 8～0.257 8±0.009 0,差异均有统计学意义;Ⅲ型胶原蛋白为0.198 9±0.027 8～0.412 9±0.010 8,差异亦均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);T组FB中Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原的表达均比S组明显减少,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 利用RNA干扰技术将MMP-12-siRNA表达质粒转染FB,可沉默MMP-12基因的表达,并可减少Ⅰ及Ⅲ型胶原蛋白的沉积,证实MMP-12基因在矽肺纤维化的发展中起重要作用.
作者：尹丹丹；唐军栋；高路杨；景友玲；马小兵；张云香；王献华
来源：职业与健康 2017 年 33卷 16期
