目的分析酵母Candida Cloacae中长链脂肪酸醇氧化酶的酶活性结构域.方法利用RT-PCR技术,从酵母Candida cloacae细胞中克隆长链脂肪酸醇氧化酶的5个不同长度的cDNA片段.扩增这些片段的上游引物5'端引入了NheI限制性内切酶位点和起始密码ATG,下游引物5'端引入了NheI限制性内切酶位点.扩增产物经NheI消化后,被克隆进T7启动子控制下的表达质粒pET-17b中,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株.结果转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株表达出5个不同长度的长链脂肪酸醇氧化酶的羧基端肽段,其氨基酸残基数分别为535AA(50KD)、473AA(43KD)、411AA(38KD)、306AA(26KD)和216AA(18KD).与完整的长链脂肪酸醇氧化酶(697AA)相比较,相当于它们分别从氨基端被切除162、224、288、391和481个氨基酸,其酶活性分别下降了18.8
作者：葛正龙
来源：遵义医学院学报 2004 年 27卷 2期
