目的 以多糖含量为考核指标,筛选分离纯化戴氏虫草(Metarhiziun taii,M.taii)多糖最佳吸附树脂,探讨其最佳吸附工艺,建立M.taii多糖分离纯化方法.方法从8种吸附树脂中筛选最佳吸附大孔树脂;通过静态吸附曲线和解吸附曲线确定树脂对多糖吸附与解吸附饱和情况,不同洗脱剂洗脱后采用L9(3)4正交实验对树脂吸附主要相关因素(多糖浓度、pH、温度及振荡频率)进行考察,确定大孔树脂吸附及解吸附最优条件;并进行动态吸附实验考察树脂最大吸附能力;采用不同洗脱剂进行连续梯度洗脱以观察动态洗脱情况.结果 8种不同树脂中,D101大孔树脂最适合M.taii多糖的分离纯化,约5h静态吸附与解吸附达到饱和,最佳洗脱剂为60%乙醇溶液,最优条件为pH6.0、20℃、低浓度多糖液(2.5 ~3.0mg/mL)、每15分钟混匀1次.经验证,多糖吸附率、解吸附率及脱色率分别为(71.85±1.12)%、(74.37±2.94)%和(64.84±1.89)%;动态吸附结果表明,每1 g树脂吸附7.79 mg多糖达到饱和;M.taii多糖液经D101大孔树脂柱层析纯化,用纯水和15%乙醇溶液就能将大部分多糖洗脱.结论 D101大孔树脂是一种较理想的分离纯化虫草多糖的树脂,为虫草多糖的分离纯化提供了实验依据.
作者:肖代敏;吕纯莉;曹喻;肖建辉;张志敏
来源:遵义医学院学报 2015 年 38卷 5期